实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
乳腺癌细胞；MDA-MB-453 | 贴壁生长 | EY-X63220 |
细胞名称 乳腺癌细胞；MDA-MB-453
形态特性: 上皮样；多角形
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系由CailleauR在1976年从一名48岁的患有转移性乳腺癌的白人女性的心包渗出液中分离建立的。该细胞表达FGF的受体。
培养条件: L15:LeibovitzMedium10%FBS
传代方法: 1:2~1:6传代；每周2~3次。
传代情况: C5
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法（-）
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
ELISA Kit
人EB病转化的B拉丁属名: Bacillus subtilis2-溴-3'-羟基苯乙酮Human PRKAR1B ELISA Kit
EB病转化的人B淋巴拉丁属名: Debaryomyces hansenii(R)-(-)-3-羟基丁酸乙酯Human PRDM15(PR domain zinc finger protein 15) ELISA Kit
人组织淋巴瘤拉丁属名: Bacillus sp.(R)-(-)-3-羟基丁酸乙酯Human PRDM4 ELISA Kit
人慢粒白血病注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用3-环基-3-氧代酸乙酯Human PRKD2 ELISA Kit
人急性白血病注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用3-环基-3-氧代酸乙酯Human PREB ELISA Kit
非Hodgkin淋巴瘤注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用4-溴苯异酸酯Human PRKCDBP ELISA Kit
人急性髓白血病拉丁属名: Penicillium chrysogenum4-溴苯异酸酯Human PRKAR2B ELISA Kit
人慢性髓原白血病拉丁属名: Bacillus cereus1,2-二溴-4,5-二甲苯Human LALBA(Alpha-lactalbumin) ELISA Kit
人前B淋巴母瘤用途: 研究乙烯-醋酸乙烯共聚物Human PRELID1 ELISA Kit
前B淋巴注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用甲基烯酸苄基酯Human DHH(Desert hedgehog protein) ELISA Kit
人结肠癌耐耐药株拉丁属名: Brevibacterium sp.甲基烯酸苄基酯Human PPP4R2 ELISA Kit
中国仓鼠卵巢拉丁属名: Cystofilobasidium capitatum烯基磺酸Human PRKG2 ELISA Kit
男性正常系拉丁属名: Bacteroides acidifaciens烯基磺酸Human PPPDE1 ELISA Kit
人肺成纤维拉丁属名: faecalis烯基磺酸Human PPP6C ELISA Kit
人皮肤基底癌拉丁属名: Bacillus subtilis4,4'-双[二(3,5-二甲苯基)氨基]-4''-苯基三苯Human PPP4C ELISA Kit
鸭胚胎成纤维注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用原丁酸三乙酯Human PPP5C ELISA Kit
斑马鱼胚胎成纤维
乳腺癌细胞；MDA-MB-453小鼠骨钙素/骨谷氨蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒ABAbELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒ABAELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA试剂盒ABCA1ELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒ABM-AbELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒ABPELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠雌激素(E)ELISA试剂盒AC-1ELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒ACA/CENPELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠(cAMP)ELISA试剂盒ACACELISAKit产品规格:48T/96T。
