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DH5α(含pBR322质粒)大肠杆菌说明书
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 DH5α(含pBR322质粒)大肠杆菌说明书

 Escherichi

 EY-J963284

资源名称: DH5α(含pBR322质粒)大肠杆菌

种属: Escherichia coli DH5α(pBR322)

提供形式: 西林瓶,菌片

安全等级: 1

模式菌株: no

应用领域: pBR322质粒提取。

培养基: LB培养基,含50μg/mL氨苄钠。

酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,琼脂 15.0 g,蒸馏水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。 灭菌结束,冷却降温后加入氨苄钠,使培养基中氨苄钠最终含量为50μg/mL。

生长条件: 37℃  ,好氧

存储条件: -20℃避光保存;运输条件:常温运输。


低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法保存。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备 
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备 
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备 
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
Burkholderia│metalresisns sp. nov. 中文名称:抗金属伯克霍尔德氏菌Burkholderia│metalresisns sp. nov.分离基物:土壤提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:分类学研究。培养方法培养基:CM0992生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Tangfeifania│gahaiensis gen. nov. sp. nov. 中文名称:尕海汤飞凡菌Tangfeifania│gahaiensis gen. nov. sp. nov.分离基物:青海尕海沉积物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:分类学研究培养方法培养基:CM0444生长条件:28℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Pseudoalromonas│sp. 中文名称:假交替单胞菌属Pseudoalromonas│sp.分离基物:半滑舌鳎病鱼肾脏提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:该菌为半滑舌鳎肾脏坏死病的致病菌,目前国内对该病尚无,保存该菌对于该病研究,建立病原库具有意义。培养方法培养基:CM0444生长条件:28℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Penicillium│commune 中文名称:普通青霉Penicillium│commune分离基物:苔藓提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:CM0014生长条件:28℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:96%

Bacillus│subtilis phage 中文名称:枯草芽孢杆菌噬菌体Bacillus│subtilis phage分离基物:纳豆产品提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:CM0002生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:96%

Staphylococcus│sp. 中文名称:葡萄球菌属Staphylococcus│sp.分离基物:北京香山黄栌叶片提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:CM0033生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Penicillium│sp. 中文名称:青霉属Penicillium│sp.分离基物:冬虫夏草提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:CM0014生长条件:20℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Methylobacrium│sp. 中文名称:甲基杆菌属Methylobacrium│sp.分离基物:大溪地诺尼种子提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:CM0033生长条件:28℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:1mol/L THF溶液
DH5α(含pBR322质粒)大肠杆菌说明书m EC-broth with Nocobiocin mEC肉汤(含新生霉素)人食道上皮细胞cDNA3-氟-5-(三氟甲基)甲C-erbB-4/HER4/erbB-4 (epidermal growth factor receptor4)  c-erbB-4癌基因抗原

Agar MFC Mfc 琼脂人食道平滑肌细胞cDNA3-氟-5-(三氟甲甲CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator)  囊性纤维化跨膜转运调节因子抗原

Enterobacteriac enrichment broth acc.to MOSSEL肠杆菌富集肉汤人肠微血管内皮细胞cDNA2-溴-5-基吡CG6856-PA peptide  CG6856-PA抗原

MRS agar Lactobacillus agar acc.to DEMAN,ROGOSA and SHARPE MRS人肠平滑肌细胞cDNA2-溴-5-基吡CGA(Chromogranin A)  嗜铬粒素A抗原

琼脂/乳菌琼脂人结肠平滑肌细胞cDNA4'-溴-2,2':6',2''-三联吡CGB(Chromogranin B)  嗜铬粒素B抗原

MRS agar Lactobacillus broth acc.to DEMAN,ROGOSA and SHARPE MRS人肺微血管内皮细胞cDNA二磷乙酯ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor)  蕈型乙酰胆受体M1抗原

琼脂/乳菌琼脂人肺动脉内皮细胞cDNA二磷乙酯ChRM3 peptide  蕈型乙酰胆受体M3抗原

MR-VP broth Methylred-VOGES-PROSKAUER broth MR-VP肉汤/甲基红 VOGES-PROSKAUER肉汤人肺动脉平滑肌细胞cDNA二硝氧化锆水合物, PuratronicCK18(Cytokeratin 18)  细胞角蛋白18(多肽)
综合微生物的培养方法,包括以下步骤:
1)前期准备:(A)灭菌处理;(B)制备Biolite水;(C)检查设备和材料;
2)按比例配制培养材料;
3)导入曝气,进行繁殖培养;
4)取液观察;(a)取液;(b)稀释菌液;(c)平板培养;
5)分离并检测;
6)取液储存;通过该综合微生物培养方法简单可操作性强,培养的综合微生物均在3代以内,菌类稳定不发生突变,且繁殖快速。

 

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