综合微生物的培养方法,包括以下步骤:
(1)前期准备:(A)灭菌处理;(B)制备Biolite水;(C)检查设备和材料;
(2)按比例配制培养材料;
(3)导入曝气,进行繁殖培养;
(4)取液观察;(a)取液;(b)稀释菌液;(c)平板培养;
(5)分离并检测;
(6)取液储存;通过该综合微生物培养方法简单可操作性强,培养的综合微生物均在3代以内,菌类稳定不发生突变,且繁殖快速。
规格参数:
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
DH5α(含pACYC184质粒)大肠杆菌说明书 | 提供形式: 西林瓶, | EY-J963280 |
资源名称: DH5α(含pACYC184质粒)大肠杆菌
提供形式: 西林瓶,菌片
安全等级: 1
模式菌株: no
应用领域: pACYC184质粒提取。
培养基: LB培养基,含50μg/mL氨苄钠。
存储条件: -20℃避光保存;运输条件:常温运输。
低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法保存。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
Bacillussubrraneus 中文名称:BacillussubrraneusBacillussubrraneus分离基物:安全等级:1模式菌株:no培养方法生长条件:40℃ 纯度:97%
Helcococcuskunzii 中文名称:HelcococcuskunziiHelcococcuskunzii分离基物:人类的伤口安全等级:1模式菌株:no培养方法生长条件:37℃ 纯度:98%
Streptomycesexfolias 中文名称:脱叶链霉菌Streptomycesexfolias安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:159生长条件:28℃ 纯度:98%
Clostridium│sp. 中文名称:梭菌属Clostridium│sp.分离基物:窖泥提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:丁、香料或酿酒。培养方法培养基:CM0858生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:98%
Azotobacr│sp. 中文名称:固氮菌属Azotobacr│sp.提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:固氮菌肥。培养方法培养基:CM0014生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:≥99%
Clostridium│kluyveri 中文名称:克氏梭菌Clostridium│kluyveri分离基物:酒糟提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:白酒增香。培养方法培养基:CM0172生长条件:30℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:98%
Smphylium│botryosum 中文名称:簇孢匍柄霉Smphylium│botryosum提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:产木质素酶。培养方法培养基:CM0077生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:98%
Scopulariopsis│brevicaulis 中文名称:短柄帚霉Scopulariopsis│brevicaulis提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:防霉抗菌。培养方法培养基:CM0014生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:98%
DH5α(含pACYC184质粒)大肠杆菌说明书Legionella CYE agar basis 军团杆菌CYE琼脂基础人脑膜细胞cDNA反式二氨基二化铂(II), Pt minArgireline peptide 抗皱寡肽-1/六胜肽-3/阿基瑞林/乙酰六胜肽-3
Legionella BCYE alpha-growth supplement 军团杆菌CYEa-生长添加剂人神经元cDNA化钬(III)六水合物GHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2) 醋促生长激素释放肽2
Legionella Combi-Pack 军团杆菌复合包人小脑颗粒细胞cDNA化钬(III)六水合物GHRP-6 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 6) 醋促生长激素释放肽6
Legionella GVPC selective supplement 军团杆菌GVPC选择添加剂人海马趾神经细胞cDNA盐苄丝肼Matrixyl Acetate 五胜肽/美容肽—M肽
LB broth acc.to Lennox LB肉汤人少突胶质前体细胞cDNA盐苄丝肼MT-II(Melanotan II Acetate) 醋美拉诺坦II
LEIFSON agar deoxycholate citrate agar acc.to LEIFSON ,modified LEIFSON 改性琼脂/脱氧胆盐柠檬檬盐琼脂人少突胶质前体细胞(悬浮生长)cDNA亚叶钙水合物Pentapeptide-3/Leuphasyl 五胜肽
Letheen agar base modified letheen 改性琼脂基础人雪旺细胞cDNA亚叶钙水合物PT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽
Letheen-Broth Base modified letheen 改性肉汤基础人神经束膜细胞cDNA1--2-(易)CD45 CD45(白细胞共同抗原)