商品属性：
产品名称 | SK-MEL-2人皮肤黑色素瘤细胞 | 鉴定 | STR鉴定正确 |
货号 | E-XB6269 | 种属 | 人 |
生长特性 | 贴壁细胞 | 细胞形态 | 多边形 |
商品详情：
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 多边形
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度：液氮
培养方案A（默认）
生长培养基:
DMEM＋10% FBS＋1%P/S
培养条件:
气相：空气，95%；CO2，5%, 温度：37℃
推荐传代比例 1:3-1:6
推荐换液频率 2-3天/次
参考资料(来源文献)
年龄（性别） 男性；60岁
组织来源 皮肤
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 黑色素瘤细胞
生物安全等级 BSL-1
倍增时间 32 hours (PubMed=7718330); 45.5 hours (NCI-DTP); ~56 hours (PBCF)
抗原表达情况 Blood Type A; Rh+
保藏机构 ATCC; HTB-68 CLS; 300423 KCLB; 30068 NCI-DTP; SK-MEL-2
细胞系培养步骤：
细胞系培养的步骤主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。
细胞复苏：
将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。
将融化的细胞移入离心管中，加入37℃预热的DMEM培养基中（其中胎牛血清约为10%），轻轻吹匀，离心，500g离心2min，弃上清液。加入DMEM培养基清洗，弃上清液。加入DMEM培养基，轻轻吹打混匀，制成细胞悬液，接种于培养皿/瓶中，在含5% CO2的细胞培养箱中培养。
细胞传代：
当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用1X PBS清洗2次。
加入进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。
加入适量DME培养基终止消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM培养基清洗，弃上清液。加入DMEM培养基，轻轻吹打混匀，吸取10微升进行计数，然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。
细胞冻存：
当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。
加入DMEM培养基终止消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM培养基清洗，弃上清液。
这些步骤确保了细胞的生长和繁殖能够在体外环境中得到有效的维持和扩展，为科学研究提供了大量的细胞样本。
细胞系培养的步骤主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。
细胞复苏：
将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。
将融化的细胞移入离心管中，加入37℃预热的DMEM培养基中（其中胎牛血清约为10%），轻轻吹匀，离心，500g离心2min，弃上清液。加入DMEM培养基清洗，弃上清液。加入DMEM培养基，轻轻吹打混匀，制成细胞悬液，接种于培养皿/瓶中，在含5% CO2的细胞培养箱中培养。
细胞传代：
当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用1X PBS清洗2次。
加入进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。
加入适量DMEM培养基终止消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM培养基清洗，弃上清液。加入DMEM培养基，轻轻吹打混匀，吸取10微升进行计数，然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。
细胞冻存：
当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用1X PBS清洗2次。
加入进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。
加入DMEM培养基终止消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM培养基清洗，弃上清液。
这些步骤确保了细胞的生长和繁殖能够在体外环境中得到有效的维持和扩展，为科学研究提供了大量的细胞样本
细胞接收后的处理：
1）SK-MEL-2人皮肤黑色素瘤细胞收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备MEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
公司正在出售的产品：
小鼠外周血单核细胞 | 人非小细胞肺癌细胞NCI-H1650(STR鉴定正确) |
人肾上腺包膜成纤维细胞 | 人畸胎癌细胞NCCIT(STR鉴定正确) |
人胰腺成纤维细胞 | 正常人结肠上皮细胞FHC(STR鉴定正确) |
人甲状旁腺细胞 | 人脑髓母细胞瘤细胞LN-229(STR鉴定正确) |
人扁桃体动脉内皮细胞 | 人恶性黑色素瘤细胞SK-MEL-28(STR鉴定正确) |
人扁桃体动脉平滑肌细胞 | 大鼠滑膜成纤维细胞 |
人腮腺肿瘤细胞 | 人膀胱癌细胞BIU-87(STR鉴定正确) |
人子宫内膜上皮细胞 | 人小细胞肺癌NCI-H1048(STR鉴定正确) |
人子宫内膜平滑肌细胞 | 人胚肾细胞293T/17(STR鉴定正确) |
人甲状腺微血管内皮细胞 | 人逆转录病毒包装细胞系Phoenix-ECO (STR鉴定正确) |
人扁桃体上皮细胞 | 人结肠癌细胞HCT-116(STR鉴定正确) |
人扁桃体静脉平滑肌细胞 | 人结直肠腺癌细胞带绿色荧光LS174T+GFP(STR鉴定正确) |
人扁桃体成纤维细胞 | 小鼠胚胎成纤维细胞MEF（种属鉴定） |
人胰腺癌细胞 | 人胎盘细胞Hs 815.Pl(STR鉴定正确) |
人胰腺癌相关成纤维细胞 | 人乳腺腺癌细胞SK-BR-3(STR鉴定正确) |
