商品属性：
产品名称 | B16小鼠黑色素瘤细胞系 | 鉴定 | STR鉴定正确 |
货号 | E-XB6628 | 种属 | C57BL/6小鼠 |
生长特性 | 贴壁细胞 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
商品详情：
别称 B-16; B16 melanoma; B16 subline B78; B78
种属 C57BL/6小鼠
年龄（性别） 不详
组织来源 黑素瘤
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 成纤维细胞样
背景描述 B16细胞是一株小鼠黑素瘤细胞。
生物安全等级 1
生长培养基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度：液氮
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
温度：37℃
注意事项 B16系列细胞，使用DMEM培养时可能出现黑色素快速积累，细胞不增殖或死亡的情况，若您需要分泌黑色素相关实验可更换为DMEM培养。
保藏机构 JCRB; JCRB0202 KCB; KCB 93030YJ RCB; RCB1283 TKG; TKG 0144
细胞系培养步骤：
细胞系培养的步骤主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。
细胞复苏：
将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。
将融化的细胞移入离心管中，加入37℃预热的DMEM培养基中（其中胎牛血清约为10%），轻轻吹匀，离心，500g离心2min，弃上清液。加入DMEM培养基清洗，弃上清液。加入DMEM培养基，轻轻吹打混匀，制成细胞悬液，接种于培养皿/瓶中，在含5% CO2的细胞培养箱中培养。
细胞传代：
当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用1X PBS清洗2次。
加入进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。
加入适量DME培养基终止消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM培养基清洗，弃上清液。加入DMEM培养基，轻轻吹打混匀，吸取10微升进行计数，然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。
细胞冻存：
当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。
加入DMEM培养基终止消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM培养基清洗，弃上清液。
这些步骤确保了细胞的生长和繁殖能够在体外环境中得到有效的维持和扩展，为科学研究提供了大量的细胞样本。
细胞系培养的步骤主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。
细胞复苏：
将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。
将融化的细胞移入离心管中，加入37℃预热的DMEM培养基中（其中胎牛血清约为10%），轻轻吹匀，离心，500g离心2min，弃上清液。加入DMEM培养基清洗，弃上清液。加入DMEM培养基，轻轻吹打混匀，制成细胞悬液，接种于培养皿/瓶中，在含5% CO2的细胞培养箱中培养。
细胞传代：
当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用1X PBS清洗2次。
加入进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。
加入适量DMEM培养基终止消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM培养基清洗，弃上清液。加入DMEM培养基，轻轻吹打混匀，吸取10微升进行计数，然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。
细胞冻存：
当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用1X PBS清洗2次。
加入进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。
加入DMEM培养基终止消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM培养基清洗，弃上清液。
这些步骤确保了细胞的生长和繁殖能够在体外环境中得到有效的维持和扩展，为科学研究提供了大量的细胞样本
细胞接收后的处理：
1）B16小鼠黑色素瘤细胞系收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备MEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
公司正在出售的产品：
小鼠肾小球内皮细胞 | HPNE人胰腺导管细胞 |
HUT-78人T淋巴细胞白血病细胞 | JIMT-1人乳腺癌细胞 |
JF-305人胰腺癌细胞 | LN229人胶质瘤细胞 |
JEG-3人绒毛膜癌细胞 | MDA-MB-231+GFP人乳腺癌X细胞+GFP |
HUTU-80人十二脂肠腺癌 | MM.1S人多发性骨髓瘤细胞 |
HUVEC人脐静脉内皮细胞（原代细胞永生化） | NCI-H2126 人肺癌细胞 |
HUVEC+RFP人脐静脉内皮细胞永生化+RFP | NCI-N87+LUC人胃癌细胞荧光素酶标记 |
HUVEC+GFP人脐静脉内皮细胞永生化+GFP | PATU8988t（PATU8988）人胰腺癌细胞 |
IHH4人甲状腺乳头状癌细胞 | SBC-2人小细胞肺癌 |
iPS人诱导多能干细胞 | SK-N-BE(2)人神经母细胞瘤细胞 |
Ishikawa人子宫内膜癌细胞 | SW1990人胰腺癌细胞 |
IOSE-80人正常卵巢上皮细胞系 | TOV-112D人上皮性卵巢癌细胞 |
J.gamma1人急性T细胞白血病细胞 | XWLC-05云南宣威人肺腺癌细胞系 |
J82人膀胱移行细胞癌 | 707.fl白血病 |
JAR人胎盘绒毛癌细胞 | M-NFS-60白血病 |
