背景介绍：

小鼠原代角膜内皮细胞小鼠角膜内皮细胞采用混合胶原酶消化结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，小鼠角膜内皮细胞分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜的高度透明性和光学性是正常发挥生理功能的必要条件之一，而角膜内皮细胞（CEC）在维持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜内皮细胞是角膜内层的单层细胞，构成了后弹力层和房水之间的物理屏障，通过离子“泵"功能调节角膜中离子浓度和水分，维持角膜的半脱水状态，保证角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜内皮细胞功能出现紊乱，常导致角膜水肿而使角膜部分甚至失去透明性。角膜内皮细胞主要功能有：①角膜是的无血管的组织，具有透明的特性和合成许多蛋白的功能；②角膜内皮细胞对角膜透明性有重要作用；③角膜内皮细胞通过Na+-K+-ATP酶活性，维持角膜和房水内Na+梯度，防止水分渗入角膜内，维持角膜实质层相对脱水状态，维持透明性。

商品属性：

形态：内皮细胞样

培养基：小鼠角膜内皮细胞wan全培养基

传代比例：传代建议1：2传代，1:2传代是1个T25瓶传2个T25瓶或2个6cm皿

细胞基本属性：

种属来源:小鼠

组织来源:眼角膜

生长特性:贴壁生长

产品规格:5x105cells/T25或1mL冻存管

培养条件气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

换液频率:每2-3天换液一次

消化液:

产品货期:4周左右

运输方式:T25培养瓶/顺丰快递（包邮）

供应限制:仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。

4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

5.客户在细胞培养过程中，有任何可以咨询我们在线客服。

原代细胞和传代细胞培养有含义、培养过程、培养结果和应用四个方面区别：
一、含义不同

原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养，也称初代培养。原代培养是将培养物放置在体外生长环境中持续培养，中途不分割培养物的培养过程。

传代培养是指需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养的过程。

二、培养过程不同

原代培养将动物组织从机体中取出离散成单个细胞(常用，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。培养过程相对复杂，培养条件要求也高，在所有的操作过程中，都必须保持培养物及生长环境的无菌。

传代培养是在原代细胞基础上通过等物质消化后继续用于细胞培养的细胞，它与原代细胞具有相同核型。这类细胞在体外可以无限制分裂。一般普通培养条件下都容易生存，传代细胞容易增殖。但也要注意无菌操作并防止细胞之间的交叉污染，所有操作要尽量靠近酒精灯火焰。每次最好只进行一种细胞的操作。

三、培养结果不同

原代培养细胞会分裂。原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了，细胞的生长就会出现停滞，大部分细胞衰老死亡。细胞接种后一般几小时内就能贴壁，并开始生长，如接种的细胞密度适宜，5天到一周即可形成单层。

传代培养一般传到40到50代。一般情况，传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上，2到4天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。

四、应用不同

原代细胞培养为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段，同时也为以后传代培养创造条件。利用此方法还可直接服务于临床实践。例如，用从手术中切除的肿瘤细胞进行原代培养，然后用该培养细胞进行抗癌药物的筛选，来帮助选择化疗方案。

传代培养主要应用在医学领域，如口腔医学领域重新构建结构复杂的牙根，还有改良羊水细胞培养技术，可多次获得有效地细胞克隆，大大提高培养成功率，增加了可分析核型数量，提高了产前诊断工作的质量和效益。

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