小鼠原代海马神经干原代细胞

商品属性：

细胞基本属性：

种属来源：小鼠

组织来源：脑脑

生长特性：悬浮生长

产品规格：5x105cells/T25或1mL冻存管
换液频率：每2-3天换液一次

消化液：

产品货期：5-6周左右

运输方式：T25培养瓶/ 顺丰快递（包邮）

供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

背景介绍：:海马体主要负责记忆和学习，日常生活中的短期记忆都储存在海马体中。

干细胞的研究是当前生命科学的热点，而作为干细胞重要分支的神经干胞更以其可自我更新和增殖、分化产生中枢神经类神经细胞的多分化潜能，在神经损伤修复和退行性疾病治疗等方面具有着巨大的应用潜势。神经干细胞（ｎｅｕｒａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ，ＮＳＣｓ）的发现，为中枢神经系统疾病的治疗带来了新的手段。ＮＳＣｓ是指中枢神经系统中具有自我更新、自我增殖及多向分化潜能的一类细胞。研究表明，胚胎、新生及成年哺乳动物的室管膜下区、海马、纹状体、中脑、臭球和脊髓等部位都存在神经干细胞。随着ＮＳＣｓ研究的深入，离体培养的ＮＳＣｓ已经成为常用的一种的基础工具。

细胞培养操作：

收货处理取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态

传代密度细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养

传代代数可传5代左右；3代以内状态

传代比例传代建议1：2传代，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

传代方法：

1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml培养基终止消化；

3.用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4.待细胞贴壁后，培养观察；之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。

原代细胞培养的主要步骤包括：

‌一、剥离组织，去除外膜、结缔组织等‌：将组织从动物体中取出，并去除可能存在的外膜或结缔组织等杂质。

二、‌洗涤后将组织剪成1mm左右的小块‌：使用生理盐水或其他适当的缓冲液洗涤组织，然后将其剪成约1mm大小的小块。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：将剪碎的组织块加入含有0.1%～0.2%的缓冲液中，进行消化。消化时间可根据具体实验需求选择热消化（37℃）或冷消化（4℃），热消化时间短，冷消化时间长但条件更温和。

‌四、吹打分散后，过滤、计数‌：将消化后的细胞吹打到一个离心管中，然后过滤、计数。

五、‌按30万/毫升分瓶培养‌：将计数后的细胞按30万/毫升的浓度分瓶培养。

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