产品及特点:
荧光定量PCR是在PCR体系中加入荧光化合物(荧光染料或荧光探针)。利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,使每个循环变得“可见”。本产品就是以探针法荧光定量 RT-PCR 技术为基础开发的专门检测鲍疱疹样病毒探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
铅黄肠球菌探针法PCR荧光定量试剂盒 | Enterococcus casseliflavus | EY00P8911 |
运输及保存: 低温运输,-20℃保存,保存期限为12个月。
自备试剂:样品 RNA。
分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费。
客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
染料法
探针法
可进行相对,定量表达分析,定性分析,SNP检测等
实验报告
电泳图 ·标准曲线
溶解曲线 ·扩增曲线
完整的实验过程、试剂、仪器及分析报告
使用方法
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的 DNA 段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 RT-PCR 模板稀释液,用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 RNA 的制备
7. 如果有N个样品,设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
8. 用自选方法纯化样品的RNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容。也以选购本公司的柱式病毒RNAout。本试剂盒免费赠送20次免RNA提取的核酸释放剂试用装,该释放剂的裂解液可以直接作为RT-PCR模板,省略了RNA提取步骤。
三、Probe qRT-PCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR 管,其中N+2个用于上步得到的 N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做1次重复,则标记N+4 个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(用第4号管的阳性对照稀释液做模板)。下面只以定量分析为例描述操作步骤。
10. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加)
异戊酯*(标准品) Trigonelline
4-氯-2-甲氧基苯*(标准品) Succinic acid
苄酯*(标准品) Succinic acid
2,6-二氟苯乙烯酸*(标准品) alpha-Boswellic acid
3-(二氟甲基)-5-甲基-1H-吡唑*(标准品) Eupalinolide A
异丁基二酸二乙酯*(标准品) Eupalinolide B
N-(对羟基苯基)-2-萘伏立诺他(标准品) Vinorelbine
乙酰基乙酰对氯苯*/5-*(标准品) Vinorelbine tartrate
4'-氯-4-氨基二苯氟苯咪唑(标准品) Nifura
单氟磷酸钠*(标准品) Nifura
基磺酰氯*(标准品) Hydroxytyrosol
[1,3-双(2,4,6-三基)-2-咪唑烷亚基][2-[[(4-基)亚氨基]甲基]-4氟达拉宾(标准品) 4',5,7-Trihydroxy-3',6-dimethoxyflavone
2-氯-4-氟苯*(标准品) Tiliroside
苯甲酸萘酚酯*,氟灭酸(标准品) 4',5-Dihydroxy-7-methoxyflavone
吲哚-5-甲酸甲酯氟甲喹(标准品) Khasianine
铅黄肠球菌探针法PCR荧光定量试剂盒胱天蛋白酶8(CASP8)(酶联免疫吸附试验法)*;利扎曲坦 质量规格:>98%,BR6次/盒
S100钙结合蛋白A11(S100A11)(酶联免疫吸附试验法)*;*(标准品) 质量规格:>99%,BR100ml
S100钙结合蛋白B(S100B)(酶联免疫吸附试验法)* 质量规格:> 95%,BR6次/盒
白介素10(IL10)(酶联免疫吸附试验法)* 质量规格:>98%,BR3×1ml
白介素1β(IL1β)(酶联免疫吸附试验法)罗* 质量规格:>99%,BR1ml(500X)
白介素4(IL4)(酶联免疫吸附试验法)罗* 质量规格:>99%,BR500 ml
白介素6(IL6)(酶联免疫吸附试验法)罗* 质量规格:>98.5%,BR6次/盒
白介素8(IL8)(酶联免疫吸附试验法)罗*(标准品) 质量规格:>96.5%,工业级1ml(500X)