资源名称: BL21(DE3)pLysS大肠杆菌

种属: Escherichia coli BL21(DE3)pLysS

提供形式: 西林瓶，菌片

安全等级: 1

模式菌株: 未知

应用领域: 用于蛋白表达

培养基: LB琼脂培养基:酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,琼脂 15.0 g,蒸馏水 1.0 L,pH 7.0。121℃，15min灭菌。

生长条件: 37℃，有氧，LB
规格参数：

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低温存法:
①简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月；②液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法保存。
微生物菌种的培养：
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成酸性的营养环境，不利于放线菌孢子的形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制备　
霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备　
摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备　
种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。
综合微生物的培养方法，包括以下步骤：
（1）前期准备：（A）灭菌处理；（B）制备Biolite水；（C）检查设备和材料；
（2）按比例配制培养材料；
（3）导入曝气，进行繁殖培养；
（4）取液观察；（a）取液；（b）稀释菌液；（c）平板培养；
（5）分离并检测；
（6）取液储存；通过该综合微生物培养方法简单可操作性强，培养的综合微生物均在3代以内，菌类稳定不发生突变，且繁殖快速。
Streptomyces lanatus 中文名称：羊毛链霉菌Streptomyces lanatus分离基物:土壤提供形式:冻干安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:，产生防线菌素X复合物培养方法培养基:ISP-2培养基:：酵母提取物 4.0 g,麦芽提取物 10.0 g,葡萄糖 4.0 g,琼脂 15.0 g,蒸馏 1.0 L,pH7.3。121℃，15分钟灭菌。生长条件:28℃，好氧 纯度：98%

Morchella sp. 中文名称：羊肚菌属Morchella sp.提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:研究；。食用。培养方法培养基:综合PDA：马铃薯煮汁1000mL，磷二氢钾 3g，镁 1.5g，葡萄糖 20g，1 10mg，琼脂 20g，pH自然。马铃薯煮液：200g马铃薯，去皮，切块，放入蒸馏中煮沸30min，取滤液定容至1000mL,备用。121℃，15min。传代方法①冻干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂轮在冻干管壁划两圈，掰断，用200μL无菌或培养基:充分溶解，平板涂布，活化培养。 ②斜面：试管口用75%酒精擦拭后，火焰灼烧，后用无菌接种铲切块，挑取接入平板或斜面，培养。生长条件:25℃，好氧。生长特性8天长满斜面，菌丝灰白色、稀疏。存储条件:液氮超低温冻结法；定期移植法 纯度：98%

Cordyceps│militaris 中文名称：蛹虫草(北冬虫夏草，北虫草)Cordyceps│militaris提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:、药用，适合液体发酵菌丝体。培养方法培养基:CM0017生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法；定期移植法 纯度：97%

Cordyceps militaris 中文名称：蛹虫草（北冬虫夏草，北虫草）（斜面）Cordyceps militaris提供形式:斜面培养物/冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:研究；。、药用，适合液体发酵菌丝体。培养方法培养基:综合PDA琼脂：马铃薯提取液 1.0L，葡萄糖 20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O 1.5g，1 微量，琼脂 15.0g，pH6.0。生长条件:25℃，好氧生长特性15天长满斜面，菌丝洁白、浓密、丰厚、菌丝绒毛状。液体深层发酵温度23-25℃，pH值为5.5-7，发酵周期3-5天。存储条件:2-8℃，定期移植法，液氮超低温冻结法； 纯度：97%

Campylobacr coli 中文名称：结肠弯曲菌Campylobacr coli分离基物:狨猴的粪便提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:《GB4789.28培养基:和试剂的质量要求》标准菌株。质控菌株，肠道和新兴传染病研究。培养方法培养基:1、哥伦比亚血平板 2、TSA＋5%脱纤维羊血生长条件:37℃，微需氧存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：96%

Rhizobium arachis 中文名称：花生根瘤菌Rhizobium arachis安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:根瘤菌培养基:：Yeast eztract （酵母膏） 1g Soil eztract （土壤浸提液） 200ml Mannitol （） 10g Agar （琼脂） 15g Distilled war （蒸馏） 800ml pH 7.2[No]：Soil extract：Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap war. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resrilize for 20 minus at 121℃ , then mixed with othringredients and distribud. (土壤浸提液的制法：取土壤50克，加200毫升，15磅蒸煮1小时，经滤纸过滤后加补足到200毫升。)生长条件:25-28℃，好氧，48h 纯度：96%

Actinomyces oris = Actinomyces viscosus 中文名称：粘性放线菌Actinomyces oris = Actinomyces viscosus分离基物:人类痰提供形式:冻干安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:哥伦比亚血平板，建议购买即用型平板。生长条件:37℃，5%CO2，镜检为阳性杆菌，纯.24h 纯度：96%

Azotobacr vinelandii 中文名称：棕色固氮菌Azotobacr vinelandii提供形式:冻干安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:胰胨大豆琼脂（TSA）：胰蛋白胨(酪蛋白消化物) 15.0g，大豆蛋白胨(大豆木瓜蛋白酶消化物) 5.0g， 5.0g，琼脂 15.0g，pH7.3±0.2。121℃，15min。生长条件:30℃，好氧 纯度：98%
BL21(DE3)pLysS大肠杆菌说明书孟加拉红（虎红）培养基人脐动脉平滑肌细胞外周血白细胞ABL1(v-abl Abelson murine leukemia viral oncogene homolog 1)  ABL1抗原

KF链球菌琼脂大鼠垂体细胞胰岛β细胞FUCA1/Alpha L fucosidase I peptide  α-L岩藻糖苷酶抗原

KF链球菌琼脂大鼠脑膜细胞胰腺星状细胞Rabbit IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记兔IgG(细胞流式同型对照)

BCYE琼脂基础大鼠脑脊神经元胰腺导管上皮细胞Bassoon(BSN)  

GVPC琼脂基础大鼠皮质神经元颌下腺上皮细胞Bax peptide  Bax（多肽抗原）

GVPC添加物大鼠颗粒细胞腮腺细胞Leptin peptide/FITC  荧光素FITC标记瘦素抗原

胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）大鼠海马神经元视网膜微血管内皮细胞Bcl-2(抗原)  Bcl-2（多肽抗原）

改良平板计数琼脂（MPCA）大鼠黑质神经元小梁网细胞BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor)  脑源神经营养因子(脑衍化神经营养因子)（多肽片断抗原）