产品简介:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测人尿液、血清、血浆、肾组织匀浆及细胞上清液中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)蛋白浓度。检测范围覆盖0.313-20 ng/mL,灵敏度达0.16 ng/mL,适用于急性肾损伤、肾小管损伤、肾病进展监测及泌尿系统炎症研究等领域。
产品名称:人尿NGAL Elisa检测试剂盒
英文名称:NGAL ELISA Kit
产品规格:48T/96T
货号:CS-6597E
检测原理:
人尿 NGAL Elisa检测试剂盒的原理是双抗体夹心法,通过固相载体捕获抗原,再用酶标记的检测抗体进行识别,最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化:微孔板预先包被抗人NGAL抗体。
结合:加入标准品或样本,NGAL被固相抗体捕获。
检测:加入化的抗人NGAL抗体和HRP标记的亲和素,形成"抗体-抗原-酶标抗体"复合物。
显色:加入TMB底物,被HRP催化后由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值),浓度与OD值成正比。
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实验步骤:
1.试剂提前室温平衡 30 min,浓缩洗涤液按说明书稀释配制。
2.设置空白孔、标准品孔、待测样品孔,精准加样后封板。
3.37℃恒温孵育结合反应,结束后弃孔内液体拍干。
4.加满洗涤液浸泡清洗,重复洗板 3–5 次,去除未结合杂质。
5.除空白孔外,每孔加入 HRP 酶结合物,再次 37℃温育。
6.重复洗板流程洗净游离酶标抗体,保证背景干净。
7.依次加入显色液避光显色,待梯度蓝色清晰显现。
8.加入终止液终止反应,颜色由蓝转黄,即刻用酶标仪读取 OD 值。
9.根据标准曲线拟合计算,得出样本目标物质浓度。