实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：

​
细胞名称  乳腺癌细胞；BC－027
形态特性: 上皮样细胞

生长特性: 贴壁生长

特征特性: BC－027乳腺癌细胞由中国人种乳腺癌组织经培养选择获得，于2007年建立鉴定，是乳腺癌基础研究和临床研究的材料。

培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；50u/ml试剂胰岛素

传代方法: 1:3传代,2-3天传一代

传代情况: C18

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
Sinoacutine

CAS No.：4090-18-0

中文名：青风藤

分子式：C19H21NO4

百秋李 订购|咨询 　络丝蛋白(RL) 规格： 20mg

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紫草苷 订购|咨询 　载脂蛋白A1(APOA1) 规格： 20mg

瓜蒌皮对照药材 订购|咨询 　载脂蛋白A1(APOA1) 规格： 1g

党参对照药材 订购|咨询 　载脂蛋白A1(APOA1) 规格： 1g

芥 订购|咨询 　载脂蛋白A1(APOA1) 规格： 20mg

α亚 订购|咨询 　载脂蛋白A1(APOA1) 规格： 20mg

泛钙 订购|咨询 　载脂蛋白A2(APOA2) 规格： 20mg

黄豆黄素 订购|咨询 　载脂蛋白A2(APOA2) 规格： 20mg

腐 订购|咨询 　载脂蛋白A2(APOA2) 规格： 20mg

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吴茱萸内酯 订购|咨询 　载脂蛋白A2(APOA2) 规格： 20mg

内酯 订购|咨询 　载脂蛋白A4(APOA4) 规格： 10mg

单宁（UV98%） 订购|咨询 　载脂蛋白A4(APOA4) 规格： 20mg

因 订购|咨询 　载脂蛋白A4(APOA4) 规格： 20mg

白头翁皂苷B4 订购|咨询 　载脂蛋白A4(APOA4) 规格： 20mg

消旋山莨菪 订购|咨询 　载脂蛋白A5(APOA5) 规格： 20mg

AQP0/MIP26  水通道蛋白0抗体    现货供应 0.1ml ()Hyoscyamine

TYK2  非受体酪蛋白激酶2抗体    现货供应 0.1ml Dextran D70

HRH1  组受体H1抗体    现货供应 0.1ml Dextran D40

HRH2  组受体H2抗体    现货供应 0.1ml Dextran D20

phosphoHRH1(Ser398)  组受体H1抗体    现货供应 0.1ml Saxagliptin HCL

HOXA11  同源盒蛋白HOXA11抗体    现货供应 0.1ml EGCG, ()Epigallocatechin gallate/Green Tea Extract

HOXA9  同源盒蛋白HOXA9抗体    现货供应 0.1ml Dasatinib Monohydrate

HOXB5  同源盒蛋白HOXB5抗体    现货供应 0.1ml Exemestane (USP)

羟基尿素  进口、国产  英文名称:Hydroxyurea  含量:BR，99%

羟基甾族合物还原酶  进口、国产  英文名称:HSD  含量:BR，5u/ul，99%

羟甲基树脂  进口、国产  英文名称:Hydroxymethylresin  含量:BR

鞘酯  进口、国产  英文名称:Sphingomyelin  含量:BR，98%

亲和素  进口、国产  英文名称:Avidin(chikeneggwhite)  含量:BR，0.1u/mg

青G钾  进口、国产  英文名称:PenicillinGPotassiumsalt  含量:BR，98%

青G  进口、国产  英文名称:PenicillinGNasalt  含量:寡肽级，90%

青链两性B溶液  进口、国产  英文名称:Penicillin&Streptomycin&AmphotericinBsolution,γIrradiated  含量:高纯，90%，适合电泳

青链溶液  进口、国产  英文名称:Penicillin&Streptomycinsolution,γIrradiated  含量:金标级，99%，可做金标抗体

青链新溶液  进口、国产  英文名称:Penicillin&Streptomycin&Neomycinsolution,γIrradiated  含量:BR，80%
乳腺癌细胞；BC－027大肠杆菌噬菌体MS2液体培养基规格：250g用途：用于大肠杆菌噬菌体MS2培养

大豆酪蛋白消化物琼脂培养基规格：250g用途：一种通用的营养培养基,用于各种微生物的培养

规格：500g用途：微生物指示剂

琼脂规格：250g用途：用于霍乱弧菌的分离培养

蛋白胨规格：250g用途：用于制备0.1%蛋白胨水，用于空肠弯曲菌的预增菌

马铃薯液体培养基（含霉素）规格：250g用途：用于霉菌和酵母菌增菌培养