大鼠原代下丘脑神经元原代细胞
商品属性:

规格 | 5x105cells/T25或1mL冻存管 | 货号 | EY-XY3562 |
种属来源 | 大鼠 | 组织来源 | 脑组织 |
生长特性 | 贴壁生长 | 形态特征 | 神经元细胞样 |
形态:神经元细胞样
培养基:大鼠下丘脑神经元细胞专用培养基
培养环境:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代特征:可传5代左右;3代以内状态

细胞基本属性:

种属来源:大鼠
组织来源:脑组织脑组织
生长特性:贴壁生长
产品规格:5x105cells/T25或1mL冻存管
换液频率:每2-3天换液一次
消化液:0.25%胰蛋bai酶
产品货期:4周左右
运输方式:T25培养瓶/ 顺丰快递(包邮)
供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
背景介绍::大鼠下丘脑神经元细胞采用胰蛋bai酶消化法结合神经元专用培养基培养、化学试剂抑制法筛选制备而来,大鼠下丘脑神经元细胞分离自下丘脑;下丘脑又称丘脑下部,位于大脑腹面、丘脑的下方,是调节内脏活动和内分泌活动的较高级神经中枢所在。下丘脑自前向后可分三部﹐即前部(又名视前区和视上区)﹑中部(结节区)和后部(乳头体区)。下丘脑具有许多细胞核团和纤维束﹐与中枢神经系统的其它部位具有密切的相互联系。它不仅通过神经和血管途径调节脑垂体前﹑后叶激素的分泌和释放﹐而且还参与调节自主神经系统﹐如控制水盐代谢﹑调节体温﹑摄食﹑睡眠﹑生殖、内脏活动以及情绪等。下丘脑神经元与来自其他部位的神经纤维有广泛的突触联系,可以接受很多神经冲动,为内分泌系统和神经系统的中心。它们能调节垂体前叶功能,合成神经垂体激素及控制自主神经和植物神经功能。故提取下丘脑神经元进行体外培养,建立下丘脑神经元体外实验平台具有重要意义。

细胞培养操作:

收货处理取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代代数可传5代左右;3代以内状态
传代比例传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
传代方法:
1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3.用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4.待细胞贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。
原代细胞培养的主要步骤包括:

一、剥离组织,去除外膜、结缔组织等:将组织从动物体中取出,并去除可能存在的外膜或结缔组织等杂质。
二、洗涤后将组织剪成1mm左右的小块:使用生理盐水或其他适当的缓冲液洗涤组织,然后将其剪成约1mm大小的小块。
三、用0.1%~0.2%的消化:将剪碎的组织块加入含有0.1%~0.2%的缓冲液中,进行消化。消化时间可根据具体实验需求选择热消化(37℃)或冷消化(4℃),热消化时间短,冷消化时间长但条件更温和。
四、吹打分散后,过滤、计数:将消化后的细胞吹打到一个离心管中,然后过滤、计数。
五、按30万/毫升分瓶培养:将计数后的细胞按30万/毫升的浓度分瓶培养。
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