产品及特点:
荧光定量PCR是在PCR体系中加入荧光化合物(荧光染料或荧光探针)。利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,使每个循环变得“可见”。本产品就是以探针法荧光定量 RT-PCR 技术为基础开发的专门检测探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
马蛔虫探针法PCR荧光定量试剂盒 | Parascaris equorum | EY00P9215 |
运输及保存: 低温运输,-20℃保存,保存期限为12个月。
自备试剂:样品 RNA。
分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费。
客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
染料法
探针法
可进行相对,定量表达分析,定性分析,SNP检测等
实验报告
电泳图 ·标准曲线
溶解曲线 ·扩增曲线
完整的实验过程、试剂、仪器及分析报告
使用方法
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的 DNA 段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 RT-PCR 模板稀释液,用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 RNA 的制备
7. 如果有N个样品,设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
8. 用自选方法纯化样品的RNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容。也以选购本公司的柱式病毒RNAout。本试剂盒免费赠送20次免RNA提取的核酸释放剂试用装,该释放剂的裂解液可以直接作为RT-PCR模板,省略了RNA提取步骤。
三、Probe qRT-PCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR 管,其中N+2个用于上步得到的 N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做1次重复,则标记N+4 个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(用第4号管的阳性对照稀释液做模板)。下面只以定量分析为例描述操作步骤。
10. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加)
苯甲酸,安息香酸人参皂苷Re(标准品)Human LDOC1 ELISA Kit
苯甲酸,安息香酸(标准品)人参皂苷Rf(标准品)Human LCORL ELISA Kit
磺间二甲氧嘧啶钠人参皂苷Rg1(标准品)Human LEF1 ELISA Kit
磺间二甲氧嘧啶钠人参皂苷Rg2(标准品)Human LDHAL6A ELISA Kit
磺间二甲氧嘧啶钠(标准品)人参皂苷Rh1(标准品)Human LCTL ELISA Kit
毛地黄苷配基人参皂苷Rh3(标准品)Human LDB1 ELISA Kit
柯诺辛碱人参皂苷Rh7(标准品)Human LDLRAD1 ELISA Kit
(标准品)人参皂苷Rh8(标准品)Human LDB3 ELISA Kit
(标准品)人参皂苷Rk1(标准品)Human LEF1 ELISA Kit
夫西地酸钠人参皂苷Rk2(标准品)Human LDOC1 ELISA Kit
夫西地酸钠人参皂苷RK3(标准品)Human LEFTY2 ELISA Kit
夫西地酸钠(标准品)人参皂苷Ro(标准品)Human LCTL ELISA Kit
3,5-二-L-人工虎骨(标准品)Human LDB1 ELISA Kit
3,5-二-L-(标准品)Human LDHAL6A ELISA Kit
3,5-二-L-忍冬藤(标准品)Human LATS2 ELISA Kit
马蛔虫探针法PCR荧光定量试剂盒Discs大同源物4(DLG4)(酶联免疫吸附试验法)1 M Tris-缓冲液,pH 9.0,灭菌 质量规格:>98%,ATP竞争性的mTOR抑制剂
神经调节素4(NRG4)(酶联免疫吸附试验法)1 x PBS (包含脱脂奶粉) 粉末 质量规格:>99%,CXCR4趋化因子受体拮抗剂
氨酰转移酶(OCT)(酶联免疫吸附试验法)10 x TPE Buffer 质量规格:>95%,BR
神经调节素3(NRG3)(酶联免疫吸附试验法)10%AEBSF溶液 质量规格:>99.0%(GC),进分
无翅型MMTV整合位点家族成员5A(WNT5A)(酶联免疫吸附试验法)2 x Blue Native PAGE Sample Buffer 质量规格:分析标准品
Ⅰ型胶原α1(COL1α1)(酶联免疫吸附试验法)2 x TBE-Urea Sample Buffer 质量规格:>99%,BR
甘露糖受体C1(MRC1)(酶联免疫吸附试验法)2-氨基噻唑(>98%,BR) 质量规格:>98%,BR
甘露糖受体C1(MRC1)(酶联免疫吸附试验法)2-氨基噻唑(>98%,BR) 质量规格:>97%