人原代胎盘微血管内皮原代细胞
细胞培养操作:

收货处理取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代代数可传5代左右;3代以内状态
传代比例传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
传代方法:
1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3.用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4.待细胞贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。
商品属性:

规格 | 5x105cells/T25或1mL冻存管 | 货号 | EY-XY3261 |
种属来源 | 人 | 组织来源 | 胎盘 |
生长特性 | 贴壁生长 | 形态特征 | 上皮样,多角形细胞 |
形态:上皮样,多角形细胞
培养基:人胎盘微血管内皮细胞专用培养基
培养环境:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代特征:可传5代左右;3代以内状态

细胞基本属性:

种属来源:人
组织来源:胎盘胎盘
生长特性:贴壁生长
产品规格:5x105cells/T25或1mL冻存管
换液频率:每2-3天换液一次
消化液:
产品货期:3-4周
运输方式:T25培养瓶/ 顺丰快递(包邮)
供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
背景介绍::胎盘是人类妊娠期间由胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的器官。胎儿在子宫中发育,依靠胎盘从母体取得营养,而双方保持相当的独立性。
胎盘对胎儿的正常发育起着至关重要的作用,而良好的胎盘血管网络的形成,是维持正常妊娠的前提。作为胎盘血管床的主要构成部分之一,胎盘微血管内皮细胞参与胎盘血管形成与重塑、调节血管舒缩,在维持胎盘血管床的血流稳态中发挥着重要作用。

原代细胞培养的主要步骤包括:

一、剥离组织,去除外膜、结缔组织等:将组织从动物体中取出,并去除可能存在的外膜或结缔组织等杂质。
二、洗涤后将组织剪成1mm左右的小块:使用生理盐水或其他适当的缓冲液洗涤组织,然后将其剪成约1mm大小的小块。
三、用0.1%~0.2%的消化:将剪碎的组织块加入含有0.1%~0.2%的缓冲液中,进行消化。消化时间可根据具体实验需求选择热消化(37℃)或冷消化(4℃),热消化时间短,冷消化时间长但条件更温和。
四、吹打分散后,过滤、计数:将消化后的细胞吹打到一个离心管中,然后过滤、计数。
五、按30万/毫升分瓶培养:将计数后的细胞按30万/毫升的浓度分瓶培养。
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