大鼠原代成骨原代细胞
商品属性:

规格 | 5x105cells/T25或1mL冻存管 | 货号 | EY-XY3470 |
种属来源 | 大鼠 | 组织来源 | 颅骨 |
生长特性 | 贴壁生长 | 形态特征 | 长梭状,不规则 |
形态:长梭状,不规则
培养基:大鼠成骨细胞全培养基
培养环境:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代特征:可传5代左右;3代以内状态

细胞基本属性:

种属来源:大鼠
组织来源:颅骨颅骨
生长特性:贴壁生长
产品规格:5x105cells/T25或1mL冻存管
换液频率:每2-3天换液一次
消化液:0.25%胰蛋bai酶
产品货期:6周左右
运输方式:T25培养瓶/ 顺丰快递(包邮)
供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
背景介绍::大鼠成骨细胞采用先用胰蛋bai酶短时间消化、后用胶原酶反复消化制备而来。大鼠成骨细胞分离自颅骨组织;颅骨位于脊柱上方,由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成。除下颌骨及舌骨外,其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结,起着保护和支持脑、感觉器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部,内有颅腔,容纳脑,共8块。面颅为颅的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等结构,构成面部的支架,共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建,骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域,分泌酸性物质溶解矿物质,分泌蛋bai酶消化骨基质,形成骨吸收陷窝;其后,成骨细胞移行至被吸收部位,分泌骨基质,骨基质矿化而形成新骨;破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础,也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。成骨细胞是骨发生和骨形成的重要细胞,具有合成、分泌组成骨基质的胶原和糖蛋白的作用,并通过钙化基质形成骨组织。另外,成骨细胞在维持机体内环境的稳定,生理机制调节和骨代谢性疾病中亦发挥重要作用。

细胞培养操作:

收货处理取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代代数可传5代左右;3代以内状态
传代比例传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
传代方法:
1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3.用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4.待细胞贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。
原代细胞培养的主要步骤包括:

一、剥离组织,去除外膜、结缔组织等:将组织从动物体中取出,并去除可能存在的外膜或结缔组织等杂质。
二、洗涤后将组织剪成1mm左右的小块:使用生理盐水或其他适当的缓冲液洗涤组织,然后将其剪成约1mm大小的小块。
三、用0.1%~0.2%的消化:将剪碎的组织块加入含有0.1%~0.2%的缓冲液中,进行消化。消化时间可根据具体实验需求选择热消化(37℃)或冷消化(4℃),热消化时间短,冷消化时间长但条件更温和。
四、吹打分散后,过滤、计数:将消化后的细胞吹打到一个离心管中,然后过滤、计数。
五、按30万/毫升分瓶培养:将计数后的细胞按30万/毫升的浓度分瓶培养。
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