大鼠原代脾淋巴原代细胞
细胞培养操作:

收货处理取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代代数可传5代左右;3代以内状态
传代比例传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
传代方法:
1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3.用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4.待细胞贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。
商品属性:

规格 | 5x105cells/T25或1mL冻存管 | 货号 | EY-XY3558 |
种属来源 | 大鼠 | 组织来源 | 脾脏 |
生长特性 | 悬浮生长 | 形态特征 | 圆形 |
形态:圆形
培养基:大鼠脾淋巴细胞专用培养基
培养环境:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代特征:可传5代左右;3代以内状态

细胞基本属性:

种属来源:大鼠
组织来源:脾脏脾脏
生长特性:悬浮生长
产品规格:5x105cells/T25或1mL冻存管
换液频率:每2-3天换液一次
消化液:
产品货期:5-6周左右
运输方式:T25培养瓶/ 顺丰快递(包邮)
供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
背景介绍::大鼠脾淋巴细胞采用机械研磨法结合密度梯度离心法制备而来,大鼠脾淋巴细胞分离自脾脏组织;脾脏是机体最大的免疫器官,占全身淋巴组织总量的25%,含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心。位于左季肋区后外方肋弓深处,与9-11肋相对,长轴与第10肋一致。膈面与膈肌和左肋膈窦相邻,前方有胃,后方与左肾、左肾上腺毗邻,下端与结肠脾沟相邻,地柔软的网状内皮细胞器官。淋巴细胞(lymphocyte)白细胞的一种,由淋巴器官产生,机体免疫应答功能的重要细胞成分。淋巴器官根据其发生和功能的差异,可分为中枢淋巴器官(又名初级淋巴器官)和周围淋巴器官(又名次级淋巴器官)两类。前者包括、腔上囊或其相当器官(有人认为在哺乳动物是骨髓)。它们无须抗原刺激即可不断增殖淋巴细胞,成熟后将其转送至周围淋巴器官。后者包括脾、淋巴结等。成熟淋巴细胞需依赖抗原刺激而分化增殖,继而发挥其免疫功能。

原代细胞培养的主要步骤包括:

一、剥离组织,去除外膜、结缔组织等:将组织从动物体中取出,并去除可能存在的外膜或结缔组织等杂质。
二、洗涤后将组织剪成1mm左右的小块:使用生理盐水或其他适当的缓冲液洗涤组织,然后将其剪成约1mm大小的小块。
三、用0.1%~0.2%的消化:将剪碎的组织块加入含有0.1%~0.2%的缓冲液中,进行消化。消化时间可根据具体实验需求选择热消化(37℃)或冷消化(4℃),热消化时间短,冷消化时间长但条件更温和。
四、吹打分散后,过滤、计数:将消化后的细胞吹打到一个离心管中,然后过滤、计数。
五、按30万/毫升分瓶培养:将计数后的细胞按30万/毫升的浓度分瓶培养。
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