商品详情：
别称 DLD 1; DLD1; CoCL3
种属 人类
年龄（性别） 成人
组织来源 结直肠腺癌上皮细胞
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
背景描述 DLD-1细胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。在ATCC和其它地方进行的DNA指纹鉴定和染色体组型分析表明DLD-1细胞与HCT-15细胞相似，说明这两者是来自同一个人的不同克隆。DLD-1细胞和HCT-15细胞的遗传起源可通过DNA指纹鉴定证实，但染色体组型分析显示它们缺乏染色体标记一致改变或数目上一致改变。DLD-1细胞的CSAp阴性(CSAp-)，p53抗原表达呈阳性(p53抗原产生了一个C→T点突变导致241位的Ser→Phe)。DLD-1细胞角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性，癌基因N-myc的表达未做检测。DLD-1细胞表达肿瘤特异性核基质蛋白CC-2、CC-3、CC-4、CC-5和CC-6。1979年提交到ATCC的DLD-1细胞代数不明且污染了支原体，其后经过12周多种抗生素联合培养处理，处理之后每周用Hoechst染色和标准培养法检测。其后连续11个月不加抗生素培养，DLD-1细胞所有的检测呈阴性。
生物安全等级 1
生长培养基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
倍增时间 ~24-48小时
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度：液氮
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
温度：37℃
致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 99% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).
抗原表达情况 Blood Type O. The cells are weakly positive for keratins and vimentin. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. DLD-1 cells are positive for p53 antigen expression (the p53 antigen produced has a C -> T mutation re
基因表达情况 carcinoembryonic antigen (CEA) 0.5 ng/10^6 cells/10 days; colon antigen 3.
保藏机构 ATCC; CCL-221 BCRC; 60132 DSMZ; ACC-278 ECACC; 90102540
商品属性：
产品名称 | DLD-1人结直肠腺癌上皮细胞细胞系 | 鉴定 | STR鉴定正确 |
货号 | E2018 | 种属 | 人 |
生长特性 | 贴壁细胞 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞系培养步骤：
细胞系培养的步骤主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。
细胞复苏：
将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。
将融化的细胞移入离心管中，加入37℃预热的DMEM培养基中（其中胎牛血清约为10%），轻轻吹匀，离心，500g离心2min，弃上清液。加入DMEM培养基清洗，弃上清液。加入DMEM培养基，轻轻吹打混匀，制成细胞悬液，接种于培养皿/瓶中，在含5% CO2的细胞培养箱中培养。
细胞传代：
当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用1X PBS清洗2次。
加入进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。
加入适量DME培养基终止消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM培养基清洗，弃上清液。加入DMEM培养基，轻轻吹打混匀，吸取10微升进行计数，然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。
细胞冻存：
当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。
加入DMEM培养基终止消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM培养基清洗，弃上清液。
这些步骤确保了细胞的生长和繁殖能够在体外环境中得到有效的维持和扩展，为科学研究提供了大量的细胞样本。
细胞系培养的步骤主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。
细胞复苏：
将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。
将融化的细胞移入离心管中，加入37℃预热的DMEM培养基中（其中胎牛血清约为10%），轻轻吹匀，离心，500g离心2min，弃上清液。加入DMEM培养基清洗，弃上清液。加入DMEM培养基，轻轻吹打混匀，制成细胞悬液，接种于培养皿/瓶中，在含5% CO2的细胞培养箱中培养。
细胞传代：
当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用1X PBS清洗2次。
加入进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。
加入适量DMEM培养基终止消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM培养基清洗，弃上清液。加入DMEM培养基，轻轻吹打混匀，吸取10微升进行计数，然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。
细胞冻存：
当细胞密度达到80%~90%时，去掉培养基，用1X PBS清洗2次。
加入进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。
加入DMEM培养基终止消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM培养基清洗，弃上清液。
这些步骤确保了细胞的生长和繁殖能够在体外环境中得到有效的维持和扩展，为科学研究提供了大量的细胞样本
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细胞接收后的处理：
1）DLD-1人结直肠腺癌上皮细胞细胞系收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备MEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
