产品简介：
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测小鼠组织匀浆、细胞提取物中的二酰基甘油（DAG/DG）含量。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL，灵敏度达 0.16 ng/mL，适用于细胞信号转导、磷脂代谢及蛋白激酶 C 通路研究等领域。
产品名称：小鼠二酰基甘油(DAG/DG)elisa试剂盒
英文名称：DAG/DG ELISA Kit
产品规格：48T/96T
产品货号：CS-1134E
检测原理：
小鼠二酰基甘油 (DAG/DG) elisa 试剂盒的原理是竞争法，通过固相载体包被抗原与样本抗原竞争结合抗体，再用酶标抗体识别，最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化：微孔板预先包被 DAG 人工抗原。
结合：加入标准品或样本，样本 DAG 与固相 DAG 竞争结合抗体。
检测：加入酶标特异性抗体，形成抗原抗体复合物。
显色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。
测定：用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值)，浓度与 OD 值成反比。
实验步骤：
试剂准备：将试剂盒平衡至室温(20-25℃)，洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。
加样：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。
洗涤：弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后甩干，重复5次。
加检测抗体：每孔加入100μL检测抗体-HRP，37℃孵育60分钟。
洗涤：同步骤3。
显色：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分钟。
终止：每孔加入50μL终止液，立即摇匀（颜色由蓝变黄）。
检测：450nm波长测定吸光度(OD值)，15分钟内完成。
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操作步骤：
1、试剂与样本准备：
将试剂盒平衡至室温（20-25℃），按说明书稀释洗涤缓冲液（通常1:19）。
标准品：用梯度稀释至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列浓度。
样本：血清、血浆或组织匀浆上清。若t-PA浓度高，可按说明书（如1:10）稀释。
2、加样与孵育：
每孔加入100μL标准品或样本。
轻轻振荡混匀，避免触碰孔壁。
37℃孵育90分钟（部分试剂盒可能为120分钟，需以说明书为准）。
3、洗涤：
弃去孔内液体，用洗涤缓冲液加满每孔，静置30秒后甩干，重复5-6次。
4、加检测抗体与孵育：
每孔加入100μL化抗猪t-PA检测抗体。
37℃孵育60分钟。
5、再次洗涤：
同步骤3，洗去未结合抗体。
6、显色：
每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。
37℃避光孵育10-15分钟。
7、终止与测定：
每孔加入50μL终止液，立即混匀（颜色由蓝变黄）。
在加终止液后15分钟内，用酶标仪在450nm波长处测定各孔吸光度（OD值）。
