本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞上清液中的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）蛋白浓度。检测范围覆盖0.313-20 ng/mL，灵敏度达0.16 ng/mL，适用于肿瘤发生发展、细胞增殖分化及相关分子机制研究等领域。

核心原理：

‌固相化‌：微孔板预先包被抗小鼠GPC-3抗体。

‌结合‌：加入标准品或样本，GPC-3被固相抗体捕获。

‌检测‌：加入化的抗小鼠GPC-3抗体和HRP标记的亲和素，形成"抗体-抗原-酶标抗体"复合物。

‌显色‌：加入TMB底物，被HRP催化后由蓝色变为黄色。

‌测定‌：用酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值)，浓度与OD值成正比。

样本要求：

1. 血清：避免溶血脂血，离心分离，-20℃分装，禁反复冻融。

2. 血浆：EDTA / 柠檬酸盐抗凝，慎用肝素，离心取上清。

3. 细胞上清：离心除杂质，-80℃保存。

4. 组织匀浆：冰上匀浆、高速离心取上清低温储存。

5. 禁忌：勿加叠氮钠抑制 HRP；拒收污染溶血样本，建议复孔检测。

操作步骤：

1. 试剂回温至 20–25℃，稀释洗涤液、梯度配制标准品。

2. 每孔加 100μL 标准 / 样本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。

3. 加 HRP 抗体，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。

4. 加 TMB 避光显色 15min，加终止液混匀。

5. 450nm 快速测 OD 值，拟合曲线算浓度。

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