产品简介：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测小鼠血清、血浆中的抗心磷脂抗体 IgM（ACA-IgM）水平。检测范围覆盖常规科研适配区间，灵敏度满足微量样本检测需求，适用于抗磷脂综合征、血栓形成、习惯性流产及自身免疫病相关研究等领域。
产品名称：小鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)elisa试剂盒
英文名称：ACA-IgM ELISA Kit
产品规格：48T/96T
产品货号：CS-0945E
检测原理：
小鼠抗心磷脂抗体 IgM (ACA-IgM) ELISA 试剂盒的原理是双抗体夹心法，通过固相载体捕获抗原，再用酶标记的检测抗体进行识别，最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化：微孔板预先包被心磷脂抗原。
结合：加入标准品或样本，ACA-IgM 与固相抗原结合。
检测：加入酶标记的抗小鼠 IgM 二抗，形成 "抗原 - 抗体 - 酶标二抗" 复合物。
显色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。
测定：用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值)，抗体水平与 OD 值成正比。
实验步骤：
试剂准备：将试剂盒平衡至室温(20-25℃)，洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。
加样：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。
洗涤：弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后甩干，重复5次。
加检测抗体：每孔加入100μL检测抗体-HRP，37℃孵育60分钟。
洗涤：同步骤3。
显色：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分钟。
终止：每孔加入50μL终止液，立即摇匀（颜色由蓝变黄）。
检测：450nm波长测定吸光度(OD值)，15分钟内完成。
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操作步骤：
1、试剂与样本准备：
将试剂盒平衡至室温（20-25℃），按说明书稀释洗涤缓冲液（通常1:19）。
标准品：用梯度稀释至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列浓度。
样本：血清、血浆或组织匀浆上清。若t-PA浓度高，可按说明书（如1:10）稀释。
2、加样与孵育：
每孔加入100μL标准品或样本。
轻轻振荡混匀，避免触碰孔壁。
37℃孵育90分钟（部分试剂盒可能为120分钟，需以说明书为准）。
3、洗涤：
弃去孔内液体，用洗涤缓冲液加满每孔，静置30秒后甩干，重复5-6次。
4、加检测抗体与孵育：
每孔加入100μL化抗猪t-PA检测抗体。
37℃孵育60分钟。
5、再次洗涤：
同步骤3，洗去未结合抗体。
6、显色：
每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。
37℃避光孵育10-15分钟。
7、终止与测定：
每孔加入50μL终止液，立即混匀（颜色由蓝变黄）。
在加终止液后15分钟内，用酶标仪在450nm波长处测定各孔吸光度（OD值）。
