产品简介:

本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测小鼠组织匀浆、细胞提取物中的 1,4,5 - 三磷酸肌醇(IP3)含量。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL,灵敏度达 0.16 ng/mL,适用于细胞信号转导、钙信号调控、磷脂代谢及受体通路研究等领域。
产品名称:小鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa试剂盒
英文名称:IP3 ELISA Kit
产品规格:48T/96T
产品货号:CS-1434E
检测原理:

小鼠 1,4,5 - 三磷酸肌醇 (IP3) elisa 试剂盒的原理是竞争法,通过固相载体包被抗原与样本抗原竞争结合抗体,再用酶标抗体识别,最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化:微孔板预先包被 IP3 人工抗原。
结合:加入标准品或样本,样本 IP3 与固相 IP3 竞争结合抗体。
检测:加入酶标特异性抗体,形成抗原抗体复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成反比。
实验步骤:

试剂准备:将试剂盒平衡至室温(20-25℃),洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。
加样:每孔加入100μL标准品或样本,37℃孵育90分钟。
洗涤:弃去液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后甩干,重复5次。
加检测抗体:每孔加入100μL检测抗体-HRP,37℃孵育60分钟。
洗涤:同步骤3。
显色:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分钟。
终止:每孔加入50μL终止液,立即摇匀(颜色由蓝变黄)。
检测:450nm波长测定吸光度(OD值),15分钟内完成。
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操作步骤:

1. 试剂回温至 20–25℃,稀释洗涤液、梯度配制标准品。
2. 每孔加 100μL 标准 / 样本,37℃孵育 90min,洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗体,37℃孵育 60min,再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光显色 15min,加终止液混匀。
5. 450nm 快速测 OD 值,拟合曲线算浓度。