本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞上清液中的抗血小板抗体IgG/M/A（PA-IgG/M/A）蛋白浓度。检测范围覆盖0.313-20 ng/mL，灵敏度达0.16 ng/mL，适用于自身免疫性血小板减少症、凝血功能及免疫相关研究等领域。
产品名称 |
小鼠抗血小板抗体IgG/M/Aelisa试剂盒 | 英文名称 | PA-IgG/M/A ELISA Kit |
货号 | CS-0944E | 规格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 仅供科研实验 |
核心原理：
固相化：微孔板预先包被抗小鼠PA-IgG/M/A抗体。
结合：加入标准品或样本，PA-IgG/M/A被固相抗体捕获。
检测：加入化的抗小鼠PA-IgG/M/A抗体和HRP标记的亲和素，形成"抗体-抗原-酶标抗体"复合物。
显色：加入TMB底物，被HRP催化后由蓝色变为黄色。
测定：用酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值)，浓度与OD值成正比。
样本要求：
1. 样本类型与处理
血清：使用无热原/内毒素试管采集，避免溶血或脂血。1000×g离心10分钟分离血清，-20℃保存，避免反复冻融。
血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，离心后取上清。
细胞上清：1000×g离心10分钟去除颗粒，-70℃保存。
组织匀浆：生理盐水匀浆后离心取上清，-20℃保存。
2. 注意事项
样本中禁止添加NaN3，以免抑制HRP活性。
细胞培养上清可能因细胞状态等因素导致检测波动，建议设复孔。
操作步骤：
试剂准备将试剂盒平衡至室温（20-25℃），浓缩洗涤液按 1:20 稀释备用。标准品按说明书进行梯度稀释，配制系列浓度标准曲线溶液。
实验流程加样：设置空白孔、标准孔、待测样品孔，空白孔仅加稀释液，其余孔分别加入标准品或待测样品，37℃孵育。加酶标抗体：除空白孔外，每孔加入酶标抗体，轻轻混匀，37℃避光孵育。洗涤：弃去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后甩干，重复洗涤 4-5 次，最后拍干残留液体。显色：每孔加入 TMB 显色液，37℃避光孵育，孔内呈现蓝色。终止：每孔加入终止液，混匀后颜色由蓝色转为黄色。检测：在 450nm 波长下测定各孔 OD 值，15 分钟内完成读数。
关键提示实验全程严格控温，孵育时使用封板膜避免蒸发。洗涤需充分，否则易造成高背景、结果偏差。显色液需避光，终止顺序与加样顺序保持一致，确保充分混匀。
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