产品简介：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞提取物中的低氧诱导因子1α（HIF-1α）蛋白浓度。检测范围覆盖0.313-20 ng/mL，灵敏度达0.16 ng/mL，适用于低氧应激、肿瘤血管生成、缺血再灌注损伤及缺氧相关疾病研究等领域。
产品名称：小鼠低氧诱导因子1αelisa试剂盒
英文名称：HIF-1α ELISA Kit
产品规格：48T/96T
产品货号：CS-1149E
检测原理：
小鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α) elisa试剂盒的原理是双抗体夹心法，通过固相载体捕获抗原，再用酶标记的检测抗体进行识别，最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化：微孔板预先包被抗小鼠HIF-1α抗体。
结合：加入标准品或样本，HIF-1α被固相抗体捕获。
检测：加入生物su化的抗小鼠HIF-1α抗体和HRP标记的亲和素，形成"抗体-抗原-酶标抗体"复合物。
显色：加入TMB底物，被HRP催化后由蓝色变为黄色。
测定：用酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值)，浓度与OD值成正比。
实验步骤：
试剂准备：将试剂盒平衡至室温(20-25℃)，洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。
加样：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。
洗涤：弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后甩干，重复5次。
加检测抗体：每孔加入100μL检测抗体-HRP，37℃孵育60分钟。
洗涤：同步骤3。
显色：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分钟。
终止：每孔加入50μL终止液，立即摇匀（颜色由蓝变黄）。
检测：450nm波长测定吸光度(OD值)，15分钟内完成。
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操作步骤：
1.试剂提前室温平衡 30 min，浓缩洗涤液按说明书稀释配制。
2.设置空白孔、标准品孔、待测样品孔，精准加样后封板。
3.37℃恒温孵育结合反应，结束后弃孔内液体拍干。
4.加满洗涤液浸泡清洗，重复洗板 3–5 次，去除未结合杂质。
5.除空白孔外，每孔加入 HRP 酶结合物，再次 37℃温育。
6.重复洗板流程洗净游离酶标抗体，保证背景干净。
7.依次加入显色液避光显色，待梯度蓝色清晰显现。
8.加入终止液终止反应，颜色由蓝转黄，即刻用酶标仪读取 OD 值。
9.根据标准曲线拟合计算，得出样本目
