产品简介:

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测小鼠血清、血浆、肠道组织匀浆中的肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)蛋白浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL,灵敏度达 0.16 ng/mL,适用于肠黏膜损伤、肠道屏障功能、脂肪吸收及胃肠疾病研究等领域。
产品名称:小鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)elisa试剂盒
英文名称:iFABP ELISA Kit
产品规格:48T/96T
产品货号:CS-1194E
检测原理:

小鼠肠脂肪酸结合蛋白 (iFABP) elisa 试剂盒的原理是双抗体夹心法,通过固相载体捕获抗原,再用酶标记的检测抗体进行识别,最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化:微孔板预先包被抗小鼠 iFABP 抗体。
结合:加入标准品或样本,iFABP 被固相抗体捕获。
检测:加入生物su化的抗小鼠 iFABP 抗体和 HRP 标记的亲和素,形成 "抗体 - 抗原 - 酶标抗体" 复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成正比。
关键实操技巧:

1.加样技巧
一次性换新枪头,垂直贴孔壁低位加液;避免气泡、飞溅交叉污染;整板加样速度均匀统一。
2.温育控温
须37℃恒温、封板膜严实防蒸发冷凝;时间严格卡死,过长背景高、过短信号低。
3.洗板核心
每孔注满不溢出,浸泡≥30 s;拍干用无尘吸水纸,杜绝残留;洗板不足直接高背景、假阳性。
4.样本规范
杜溶血、脂浊、污染样本;禁止反复冻融;严禁含 NaN₃抑制 HRP 活性;浓度超标只用试剂盒配套稀释液。
5.显色与读数
全避光;整板显色时长一致;加终止液立刻读数,放置越久数值漂移越大。
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操作步骤:

1、试剂与样本准备:
将试剂盒平衡至室温(20-25℃),按说明书稀释洗涤缓冲液(通常1:19)。
标准品:用梯度稀释至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列浓度。
样本:血清、血浆或组织匀浆上清。若t-PA浓度高,可按说明书(如1:10)稀释。
2、加样与孵育:
每孔加入100μL标准品或样本。
轻轻振荡混匀,避免触碰孔壁。
37℃孵育90分钟(部分试剂盒可能为120分钟,需以说明书为准)。
3、洗涤:
弃去孔内液体,用洗涤缓冲液加满每孔,静置30秒后甩干,重复5-6次。
4、加检测抗体与孵育:
每孔加入100μL化抗猪t-PA检测抗体。
37℃孵育60分钟。
5、再次洗涤:
同步骤3,洗去未结合抗体。
6、显色:
每孔加入90-100μL TMB底物混合液(A液+B液)。
37℃避光孵育10-15分钟。
7、终止与测定:
每孔加入50μL终止液,立即混匀(颜色由蓝变黄)。
在加终止液后15分钟内,用酶标仪在450nm波长处测定各孔吸光度(OD值)。