本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞上清液中的抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)蛋白浓度。检测范围覆盖0.313-20 ng/mL,灵敏度达0.16 ng/mL,适用于系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病相关研究等领域。
产品名称 |
小鼠抗小核糖核蛋白/Smelisa试剂盒 | 英文名称 | snRNP/Sm ELISA Kit |
货号 | CS-0949E | 规格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 仅供科研实验 |
核心原理:

固相化:微孔板预先包被抗小鼠snRNP/Sm抗体。
结合:加入标准品或样本,snRNP/Sm被固相抗体捕获。
检测:加入化的抗小鼠snRNP/Sm抗体和HRP标记的亲和素,形成"抗体-抗原-酶标抗体"复合物。
显色:加入TMB底物,被HRP催化后由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值),浓度与OD值成正比。
样本要求:

1. 血清:避免溶血脂血,离心分离,-20℃分装,禁反复冻融。
2. 血浆:EDTA / 柠檬酸盐抗凝,慎用肝素,离心取上清。
3. 细胞上清:离心除杂质,-80℃保存。
4. 组织匀浆:冰上匀浆、高速离心取上清低温储存。
5. 禁忌:勿加叠氮钠抑制 HRP;拒收污染溶血样本,建议复孔检测。
操作步骤:

试剂准备将试剂盒平衡至室温(20-25℃),浓缩洗涤液按 1:20 稀释备用。标准品按说明书进行梯度稀释,配制系列浓度标准曲线溶液。
实验流程加样:设置空白孔、标准孔、待测样品孔,空白孔仅加稀释液,其余孔分别加入标准品或待测样品,37℃孵育。加酶标抗体:除空白孔外,每孔加入酶标抗体,轻轻混匀,37℃避光孵育。洗涤:弃去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后甩干,重复洗涤 4-5 次,最后拍干残留液体。显色:每孔加入 TMB 显色液,37℃避光孵育,孔内呈现蓝色。终止:每孔加入终止液,混匀后颜色由蓝色转为黄色。检测:在 450nm 波长下测定各孔 OD 值,15 分钟内完成读数。
关键提示实验全程严格控温,孵育时使用封板膜避免蒸发。洗涤需充分,否则易造成高背景、结果偏差。显色液需避光,终止顺序与加样顺序保持一致,确保充分混匀。
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