综合微生物的培养方法,包括以下步骤:
(1)前期准备:(A)灭菌处理;(B)制备Biolite水;(C)检查设备和材料;
(2)按比例配制培养材料;
(3)导入曝气,进行繁殖培养;
(4)取液观察;(a)取液;(b)稀释菌液;(c)平板培养;
(5)分离并检测;
(6)取液储存;通过该综合微生物培养方法简单可操作性强,培养的综合微生物均在3代以内,菌类稳定不发生突变,且繁殖快速。
规格参数:
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
土曲霉品牌 | Aspergillu | EY-J963309 |
资源名称: 土曲霉
种属: Aspergillus terreus Thom
提供形式: 冻干粉
安全等级: 1
模式菌株: no
培养基: 综合PDA:20%马铃薯液1.0L,葡萄糖20.0g,二氢钾3.0g,七水镁1.5g,1 8mg,琼脂20.0g,pH自然。20%马铃薯液配置:取200g去皮马铃薯,煮沸30min,过滤取滤液,补足至1.0L。
生长条件: 25-28℃,好氧
低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法保存。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
Loktanella│maricola 中文名称:居海洛克氏菌Loktanella│maricola分离基物:样/海提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:;培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:>98.0%(GC)
Aquimarinamuelleri 中文名称:AquimarinamuelleriAquimarinamuelleri分离基物:培养基:海样本,日本安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:102生长条件:28℃ 纯度:97%
Shimiaisoporae 中文名称:ShimiaisoporaeShimiaisoporae安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:102生长条件:25℃ 纯度:97%
Loktanella│hongkongensis 中文名称:香港洛克氏菌Loktanella│hongkongensis分离基物:沉积物/深海浅黄色钙质软泥提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:端微生物/抗γ辐射培养方法培养基:1001生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:97%
Roseivivaxisoporae 中文名称:RoseivivaxisoporaeRoseivivaxisoporae安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:102生长条件:25℃ 纯度:97%
Roseivivaxhalodurans 中文名称:RoseivivaxhaloduransRoseivivaxhalodurans分离基物:叠层石上的轮藻安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:168生长条件:28℃ 纯度:97%
Gramellaechinicola 中文名称:GramellaechinicolaGramellaechinicola分离基物:中间球海胆安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:102生长条件:28℃ 纯度:99%
Oceanicola│marinus 中文名称:海洋海栖菌Oceanicola│marinus分离基物:样/上层海提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:潜在的有机污染物降解菌/分离自石油富集菌群培养方法培养基:821生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99%
土曲霉品牌Nutrient Agar人表皮黑色素细胞-中色素微小RNA4-溴异喹啉H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病A抗原
麦芽浸出液琼脂人表皮黑色素细胞-深色素微小RNA4-溴异喹啉Haase(hyaluronidase) 透明质酶/玻璃酶抗原
Malt Extract Agar人成纤维细胞-胎儿微小RNA4-溴异喹啉HA tag HA tag标签多肽
Fluid Lactose Medium人成纤维细胞-新生儿微小RNA4,4′-双(2-苯并噁唑基)二苯乙烯HA tag(map) HA tag标签(分支多肽)
Baird-Parker琼脂基础人成纤维细胞-微小RNA4,4′-双(2-苯并噁唑基)二苯乙烯HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1) 肝细胞生长因子激活物抑制因子抗原
Baird-Parker Agar Base人毛细胞微小RNA六铑三铵HBA1(hemoglobin alpha 1) 人类血红蛋白α1抗原
卵黄亚碲盐增菌液人生发基质细胞微小RNA3,5-二-4-基吡VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-containing) 乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原
EY lurite Enrichment人外根壳细胞微小RNA3,5-二-4-基吡URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原