综合微生物的培养方法,包括以下步骤:
(1)前期准备:(A)灭菌处理;(B)制备Biolite水;(C)检查设备和材料;
(2)按比例配制培养材料;
(3)导入曝气,进行繁殖培养;
(4)取液观察;(a)取液;(b)稀释菌液;(c)平板培养;
(5)分离并检测;
(6)取液储存;通过该综合微生物培养方法简单可操作性强,培养的综合微生物均在3代以内,菌类稳定不发生突变,且繁殖快速。
规格参数:
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
短短芽孢杆菌规格 | Brevibacil | EY-J963454 |
资源名称: 短短芽孢杆菌
种属: Brevibacillus brevis
提供形式: 冻干物
安全等级: 1
模式菌株: no
应用领域: 生物防治花生线虫病
培养基: 营养肉汁琼脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。
生长条件: 30℃,好氧,24h
存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法保存。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
Cercospora│variicolor G. Winr 中文名称:杂色尾孢Cercospora│variicolor G. Winr分离基物:牡丹叶片提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:99%
Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 中文名称:贝伦格葡萄座腔菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar分离基物:苹果枝干提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:99%
Armillaria│borealis Marxm. & Korhonen 中文名称:北方蜜环菌Armillaria│borealis Marxm. & Korhonen分离基物:桦树提供形式:斜面培养物模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:24存储条件:定期移植法 纯度:97%
Trichothecium│roseum (Pers.) Link 中文名称:红聚端孢霉Trichothecium│roseum (Pers.) Link分离基物:玫叶部提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:97%
Prathoda│longissima (Deighton & MacGarvie) E.G. Simmons 中文名称:长链格孢Prathoda│longissima (Deighton & MacGarvie) E.G. Simmons分离基物:玉米叶部提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:97%
Lycoperdon│pusillum Batsch 中文名称:马勃Lycoperdon│pusillum Batsch提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:100 ng/ul 基体:乙
Leucoagaricus│leucothis (Vittad.) Wasser 中文名称:纯白环菇Leucoagaricus│leucothis (Vittad.) Wasser提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:99%
Alrnaria│cucumerina (Ellis & Everh.) J.A. Elliott 中文名称:瓜链格孢Alrnaria│cucumerina (Ellis & Everh.) J.A. Elliott分离基物:黄瓜叶部提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:99%
短短芽孢杆菌规格Phospho-Cyclin B1 (Ser147) 磷化周期素B1抗体10-羟基癸烯5-溴-2-苯Human C4BP (C4 Binding Protein) ELISA Kit
Phospho-Cyclin B1 (Ser133) 磷化周期素B1抗体枣仁皂苷B5-溴-2-苯Human MUC13 (Mucin 13) ELISA Kit
Cyclin C 周期素C抗体牛磺胆钠5-溴-2-苯Human CA724 (Tumor Marker CA724) ELISA Kit
Cyclin D1 周期素D1抗体牛磺熊去氧胆3-溴-5-苯Human MUC1 (Mucin 1) ELISA Kit
Phospho-Cyclin D1 (Thr286) 磷化cyclin D1抗体盐川芎3-溴-5-苯Human CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) ELISA Kit
Cyclin D2 周期素D2抗体红景天苷3-溴-5-苯Human CaN (Calcineurin) ELISA Kit
Cyclin D3 周期素D3抗体牛蒡子苷(+)-2,2'-亚甲基双[(3aR,8aS)-3a,8a-二氢-8H-茚苯[1,2-d]并恶唑Human CGRP (Calcitonin Gene Related Peptide) ELISA Kit
Cyclin E 周期素E抗体苦杏仁苷(+)-2,2'-亚甲基双[(3aR,8aS)-3a,8a-二氢-8H-茚苯[1,2-d]并恶唑Human CTR (Calcitonin Receptor) ELISA Kit