猪原代骨骼肌原代细胞
商品属性：
规格 | 5x105cells/T25或1mL冻存管 | 货号 | EY-XY4226 |
种属来源 | 猪 | 组织来源 | 骨骼肌组织 |
生长特性 | 贴壁生长 | 形态特征 | 成纤维细胞样 |
形态：成纤维细胞样
培养基：猪骨骼肌细胞wan全培养基
培养环境：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃
传代特征：可传5代左右；3代以内状态
细胞基本属性：
种属来源：猪
组织来源：骨骼肌组织骨骼肌组织
生长特性：贴壁生长
产品规格：5x105cells/T25或1mL冻存管
换液频率：每2-3天换液一次
消化液：
产品货期：6周左右
运输方式：T25培养瓶/ 顺丰快递（包邮）
供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
背景介绍：:骨骼肌细胞（Skeletal muscle cells）是人和动物体内大的细胞之一，它们是由成肌细胞(Myoblasts)融合而来的多核细胞，故骨骼肌的形成是一个非常复杂的过程，并需要多种细胞信号通路的参与，包括phosphatidylinositol 3-kinase，calcineurin，STAT3和MAPK等。原代骨骼肌细胞的培养是研究细胞分化过程的有效的模型。
原代细胞培养的主要步骤包括：
一、剥离组织，去除外膜、结缔组织等：将组织从动物体中取出，并去除可能存在的外膜或结缔组织等杂质。
二、洗涤后将组织剪成1mm左右的小块：使用生理盐水或其他适当的缓冲液洗涤组织，然后将其剪成约1mm大小的小块。
三、用0.1%～0.2%的消化：将剪碎的组织块加入含有0.1%～0.2%的缓冲液中，进行消化。消化时间可根据具体实验需求选择热消化（37℃）或冷消化（4℃），热消化时间短，冷消化时间长但条件更温和。
四、吹打分散后，过滤、计数：将消化后的细胞吹打到一个离心管中，然后过滤、计数。
五、按30万/毫升分瓶培养：将计数后的细胞按30万/毫升的浓度分瓶培养。
细胞培养操作：
收货处理取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态
传代密度细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养
传代代数可传5代左右；3代以内状态
传代比例传代建议1：2传代，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
传代方法：
1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml培养基终止消化；
3.用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4.待细胞贴壁后，培养观察；之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。
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