羊原代睾丸间质原代细胞

细胞培养操作：

收货处理取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态

传代密度细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养

传代代数可传5代左右；3代以内状态

传代比例传代建议1：2传代，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

传代方法：

1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml培养基终止消化；

3.用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4.待细胞贴壁后，培养观察；之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。

商品属性：

形态：成纤维细胞样
培养基：羊睾丸间质细胞wan全培养基

培养环境：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃

传代特征：可传5代左右；3代以内状态

细胞基本属性：

种属来源：羊

组织来源：睾丸睾丸

生长特性：贴壁生长

产品规格：5x105cells/T25或1mL冻存管
换液频率：每2-3天换液一次

消化液：

产品货期：5-6周左右

运输方式：T25培养瓶/ 顺丰快递（包邮）

供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

背景介绍：:睾丸间质细胞成群分布在曲精小管之间，胞体呈圆形，椭圆形或不规则形，胞体较大，直径约20μm，胞质呈嗜酸性，细胞核呈圆形或卵圆形，常位于中央，染色较淡，有1～2个核仁线粒体多，呈管嵴状，无分泌颗粒。睾丸支持细胞是存在于雄性睾丸间质中的主要细胞类型，其主要功能是分泌和合成睾丸酮，睾丸酮在刺激精子发生、精子成熟及性功能的维持等方面具有重要作用。目前，以睾丸支持细胞为靶向的药物研究备受关注。体外培养的睾丸支持细胞能直接反应药物对该细胞作用的特点，使分离纯化睾丸支持细胞成为必要的前提条件。

原代细胞培养的主要步骤包括：

‌一、剥离组织，去除外膜、结缔组织等‌：将组织从动物体中取出，并去除可能存在的外膜或结缔组织等杂质。

二、‌洗涤后将组织剪成1mm左右的小块‌：使用生理盐水或其他适当的缓冲液洗涤组织，然后将其剪成约1mm大小的小块。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：将剪碎的组织块加入含有0.1%～0.2%的缓冲液中，进行消化。消化时间可根据具体实验需求选择热消化（37℃）或冷消化（4℃），热消化时间短，冷消化时间长但条件更温和。

‌四、吹打分散后，过滤、计数‌：将消化后的细胞吹打到一个离心管中，然后过滤、计数。

五、‌按30万/毫升分瓶培养‌：将计数后的细胞按30万/毫升的浓度分瓶培养。

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