综合微生物的培养方法,包括以下步骤:
(1)前期准备:(A)灭菌处理;(B)制备Biolite水;(C)检查设备和材料;
(2)按比例配制培养材料;
(3)导入曝气,进行繁殖培养;
(4)取液观察;(a)取液;(b)稀释菌液;(c)平板培养;
(5)分离并检测;
(6)取液储存;通过该综合微生物培养方法简单可操作性强,培养的综合微生物均在3代以内,菌类稳定不发生突变,且繁殖快速。
规格参数:
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
绳状青霉(斜面)品牌 | Penicilliu | EY-J963373 |
资源名称: 绳状青霉(斜面)
种属: Penicillium funiculosum
提供形式: 斜面
安全等级: 1
模式菌株: no
应用领域: 用于葡聚糖。
培养基: 综合PDA:马铃薯煮汁1000mL,二氢钾二氢钾 3g,镁 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,琼脂 20g,pH自然。马铃薯煮液:200g马铃薯,去皮,切块,放入蒸馏水中煮沸30min,取滤液定容至1000mL,备用。121℃,15min。
生长条件: 25℃,好氧
低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法保存。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
Colletotrichum│orbiculare (Berk. & Mont.) Arx 中文名称:葫芦丛壳Colletotrichum│orbiculare (Berk. & Mont.) Arx分离基物:南瓜叶片提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:26--30存储条件:定期移植法 纯度:98%
Streptomyces│virginiae Grundy et al. 中文名称:#弗吉尼亚链霉菌Streptomyces│virginiae Grundy et al.分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:益生菌培养方法培养基:12生长条件:30存储条件:定期移植法 纯度:98%
Phytophthora│capsici Leonian 中文名称:辣椒疫病Phytophthora│capsici Leonian分离基物:辣椒叶片提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:NB生长条件:26--30存储条件:定期移植法 纯度:98%
Streptomyces│cyaneogriseus Yan et al. 中文名称:#深蓝链霉菌Streptomyces│cyaneogriseus Yan et al.分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:益生菌培养方法培养基:12生长条件:30存储条件:定期移植法 纯度:95%
Streptomyces│flavus Waksman et Henrici 中文名称:#黄色链霉菌Streptomyces│flavus Waksman et Henrici分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:益生菌培养方法培养基:12生长条件:30存储条件:定期移植法 纯度:95%
Alrnaria│sp. 中文名称:#链格孢属Alrnaria│sp.分离基物:梨果实提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25-28存储条件:定期移植法 纯度:97%
Psathyrella│candolleana (Fr.) Maire 中文名称:#薄花边伞Psathyrella│candolleana (Fr.) Maire分离基物:子实体提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:28存储条件:定期移植法 纯度:97%
Balansia│take (Miyake) Hara 中文名称:*竹瘤座菌Balansia│take (Miyake) Hara分离基物:竹丛枝顶端叶鞘提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:66生长条件:25-28存储条件:定期移植法 纯度:99%
绳状青霉(斜面)品牌APNG/MPG N-甲基嘌呤DNA糖基化酶秦皮苷; 白蜡树苷3- 巯基正酯HSP-90Alpha(Heat Shock Protein 90Alpha ) 热休克蛋白90α(抗原)
APOD 载脂蛋白D抗体奇任,奇壬2--5-甲(易)HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta) 热休克蛋白-90β (抗原)
APOH 载脂蛋白H抗体高良姜素2--5-甲(易)IASPP(inhibitory member of the ASPP family) 肿瘤细胞凋亡ASPP家族的另一个成员(抗原)
APOE 载脂蛋白E抗体比枯枯灵;毕灵;荷包牡丹2--5-甲(易)CD54/ICAM-1 细胞间粘附分子-1
APOJ 载脂蛋白J抗体异槲皮苷4--2-三基异酯IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白细胞介素-1β)(多肽抗原)
Apollon/BIRC6 Apollon凋亡抑制蛋白抗体乙酰紫堇灵; 乙酰紫堇灵3-(二苯基膦基)胺IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受体相关蛋白样1前体蛋白(抗原)
APP/ABPP 淀样肽前体蛋白抗体三叶豆紫檀苷3-(二苯基膦基)胺IL-6(Interleukin-6) 白介素6(白细胞介素-6)(多肽抗原)
APP/ABPP APP/ABPP淀样肽前体蛋白抗体苷(R)-(+)-碳烯酯IL-10(Interleukin-10) 白介素10(白细胞介素-10)(抗原)