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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>结直肠腺癌细胞;HT-29
 
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产品名称:
结直肠腺癌细胞;HT-29
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
结直肠腺癌细胞;HT-29相关产品:百里酚89-83-8
茜素红130-22-3
ABTS液体底物说明书
2,6-二氟吡啶说明书
  结直肠腺癌细胞;HT-29的详细资料:

实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

结直肠腺癌细胞;HT-29

贴壁生长

EY-X63288


细胞名称  结直肠腺癌细胞;HT-29
形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞是1964年由FoghJ用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离的。近来,已建株的培养细胞用含血清的McCoy's5a培养基培养。该细胞系在裸鼠中成瘤,也能在类固醇处理的地鼠中成瘤。该细胞可合成IgA、CEA、TGFβ结合蛋白和黏液素;表达尿激酶受体,但没有检测到血浆酶原活性;不表达CD4,但细胞表面表达半乳糖神经酰胺(HIV的可能替代受体)。该细胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos阳性;p53基因过表达,并且在273位密码子处发发生G

培养条件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)5%FBS

传代方法: 1:3~1:8传代;每周2~3次换液。

传代情况: P143

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法(-)
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
小鼠杂交瘤细胞;ZMA1形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-AKT1 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞;16G12形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-BTLA Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞;ZMA6形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-CENPH Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞;ZMB5形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-SIGLEC15 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞;LCDV-V形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-Lamin B1 Monoclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞;WSSV-A形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-FLT4 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞;VEGF形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-CASP3 Polyclonal Antibody

L-组氨酸MCM2 (D7G11) XP® Rabbit mAb2-溴-6-氟甲
L-氨酸MCM2 (D7G11) XP® Rabbit mAb5-吡-2-羧酸
L-酪氨酸Presenilin 1 AntibodyN-基-哌啶酮
L-酪氨酸(标准品)PSD95 (7E3) Mouse mAb5-溴-2-酚
L-谷氨酸β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2-氟-溴吡啶
L-谷氨酸(标准品)β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)异
L-谷氨酸(sigma)NUT (C52B1) Rabbit mAb2--5-并噻唑
DL-谷氨酸CD11c (3.9) Mouse mAb (APC Conjuga)2--并噻唑
肌氨酸Ingrin β5 (D24A5) Rabbit mAb1-溴-3,二甲氧基烷
甘氨酸-DL-亮氨酸Ingrin β5 (D24A5) Rabbit mAb2',3'-异叉腺苷
L-亮氨酰甘氨酸RalBP1 (I33) Antibody5-酰基-2-甲基吡啶
蒜氨酸(标准品)Nicastrin Antibody3,二酮
L-脯氨酸ALK (D5F3®) XP® Rabbit mAb环戊
DL-缬氨酸ALK (D5F3®) XP® Rabbit mAb2,5-二氟
 L-亮氨酸(标准品) Tuberin/TSC2 (28A7) Rabbit mAb氮杂环丁烷盐酸盐
L-亮氨酸Histone H2A (L88A6) Mouse mAb邻三氟肼
DL-赖氨酸CD14 (61D3) Mouse mAb (APC Conjuga)六水硝酸铥
DL-精氨酸盐酸盐Histone H3 (96C10) Mouse mAb2,二氟
左旋肉;维生素BT;左卡尼汀Histone H3 (96C10) Mouse mAb(氟甲酰)酸
左卡尼汀;左旋肉(标准品)PRC1 Antibody-氟
L-谷氨酸钠,一水Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb2,二氟
L-谷氨酰(标准品)Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAb氟-1,2-二
谷胱甘肽(还原型)Notch Isoform Antibody Sampler Kit1,1,1-三氟-2,戊二酮
L-谷胱甘肽(标准品)Helios (D4Z6D) Rabbit mAb2-溴-5-硝基三氟甲
谷胱甘肽(氧化型)Phospho-Histone H3 (Ser10) (D2C8) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)利巴韦林
L-高丝氨酸;(S)-2-氨基-羟基丁酸BLNK (D3P2H) XP® Rabbit mAb羟基吡咯并[2,d]嘧啶
DL-异亮氨酸BLNK (D3P2H) XP® Rabbit mAb溴三
L-赖氨酸盐酸盐SATB1 (P472) Antibody葛根素
L-鸟氨酸盐酸盐T2 (D6C7K) Rabbit mAb (Mouse Specific)2,4,6-三(2-吡啶基)三
L-天门冬氨酸CDC73 (A264) Antibody三基氧翁四氟酸
L-天门冬氨酸(标准品)CDC73 (D410) Antibody2-三氟甲基吡啶
L-半胱酸盐酸盐无水物SATB1 (L745) Antibody羟基-6-(三氟甲基)嘧啶-2-硫
L-精氨酸对硝基酰cdc25A Antibody2-硝基咪唑
羧甲司坦;S-羧甲基-L-半胱氨酸Akt (pan) (40D4) Mouse mAb (Sepharose® Bead Conjuga)三氟肼
S-苄基-L-半胱氨酸GFAP (GA5) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)(三氟甲基)肼
L-谷氨酸盐酸盐GFAP (GA5) Mouse mAb (Alexa Fluor® 555 Conjuga)3',4'-二氟酮

胞样生长特性: 贴壁生长Anti-CD63 Polyclonal Antibody
结直肠腺癌细胞;HT-29大鼠艾杜糖硫酯酶(IDS)ELISA试剂盒CD30ELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA试剂盒CD44ELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒CD4ELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒CD6ELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒CD8ELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA试剂盒CDK-4ELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒CDK5ELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒CDl4ELISAKit产品规格:48T/96T。

产品相关关键字: 结直肠腺癌细胞 HT-29
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