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产品名称 | 肺细胞；HLF-a |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X63463 |
细胞名称 肺细胞；HLF-a
形态特性: 上皮样细胞
生长特性: 贴壁生长
特征特性:
培养条件:
传代方法:
传代情况: P86
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法（-）
产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA，与金属螯和层析等兼容。
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞，以0.25％消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。
2-脱氧-D-葡萄糖CTMP Antibody银
坎地沙坦MPC2 (D4I7G) Rabbit mAb扎西他滨
Ruxolitinib(INCB018424) phosphaMAML2 Antibody1,5-二羟基萘
SB1317,TG02Sox9 (D8G8H) Rabbit mAb (PE Conjuga)苄氧基
阿齐沙坦Phospho-TrkA (Tyr490)/TrkB (Tyr516) (C35G9) Rabbit mAb维生素 B2
阿齐沙坦(标准品)Phospho-TrkA (Tyr490)/TrkB (Tyr516) (C35G9) Rabbit mAbN-Boc-氨基基溴
伊维菌素(标准品)Histone H3 (D2B12) XP® Rabbit mAb (ChIP Formulad)溴-2-氟
SB431542,SB-431542Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) (C50F3) Rabbit mAb异丁基酸
米拉贝隆Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) (C50F3) Rabbit mAb6-氟-哌啶-基-1,2-并异唑盐酸盐
去氧紫草素(标准品)CD3 (UCHT1) Mouse mAb (PE Conjuga)2--5-氟甲
Tariquidar,XR-9576Exportin-1/CRM1 (D6V7N) Rabbit mAb2--氟甲
钛黄;达旦黄；钛镍黄A20/TNFAIP3 Antibody1-Boc-哌啶甲酸
双水杨酯;水杨酸-2-羧基酯β-Canin (L54E2) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-溴-5-甲
双水杨酯 ;水杨酸-2-羧基酯Tri-Methyl-Histone H3 (Lys36) (D5A7) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)-2-溴甲
盐酸鲁拉西酮TBC1D1 (V796) Antibody2,5-二氟吡啶
盐酸鲁拉西酮(标准品)IL-2Rβ (D4X3H) Rabbit mAb对氨基酸盐酸盐89415-40
樱黄素(标准品)Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (12F8) Rabbit mAb吡啶-2,二
香橙素(标准品)Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (12F8) Rabbit mAb1-甲基-1H-吡唑-5-酸频哪酯
3',4',7-三羟基黄酮(标准品)GADD45 alpha (D17E8) Rabbit mAb(-)-二异松蒎基烷
N-甲基-D-葡糖;葡RBAP46/RBAP48 Antibody羧基-2-酸
溴丁酸甲酯Phospho-ULK1 (Ser467) Antibody-5-三氟甲基吡啶
地克珠利Phospho-ULK1 (Ser467) Antibody2,5-二酸
美他环素,甲(标准品)Mouse Heart Tissue Control Extracts四氢化邻二甲酸酐
美他环素,甲盐酸盐MAD2L1 (D8A7) Rabbit mAb氟-甲氧基酸
己二酸二酰肼Cavin-1 (D8C1D) Rabbit mAb邻甲酰甲酸
化酰胆(标准品)Anti-Blue (2D2F11) Mouse mAb (HRP Conjuga)替莫唑
化酰胆TrkA and TrkB Antibody Sampler Kit芴甲氧羰基-L-天冬氨酸 苄酯
alpha-亚麻酸(标准品)YY1 (D5D9Z) Rabbit mAb羟基吡咯烷盐酸盐
MQAE(离子荧光探针)KSR1 Antibody(S)-(+)-羟基四
特立氟SimpleChIP® Oct-4 Promor Primers(R)-(-)-羟基四
当归酰基戈米辛H(标准品)AIF Antibody侧链酸
美曲勃龙(R-1881)Rab5 (E6N8S) Mouse mAb
α-Smooth Muscle Actin (1A4) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)
(+)松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷(标准品)HSP70 (D1M6J) Mouse mAb7--6-氟-1-环基-1,二氢-氧-喹啉羧酸
磺隆Autophagy Induction (ULK1 Complex) Antibody Sampler Kit2,二-5-氟甲酰
L-墨蝶呤DHX29 (G63) Antibody2-噻吨酮
邻氟酮SimpleChIP® Sox2 Promor Primers2,6-二-三氟肼
莫特塞尼Vinculin Antibody2--(三氟甲基)肼
金松双黄酮(标准品)Vinculin Antibody椰油酰基甜菜
10-羟基癸酸,10-HDA(标准品)Rac1/Cdc42 Antibody2,二甲氧基甲
艾力替尼甲磺酸盐(AST1306)Rac1/Cdc42 Antibody甲
肺细胞；HLF-a人B细胞受体(BCR)ELISA试剂盒MAPKELISAKit产品规格:48T/96T。
人丝氨/苏氨蛋白磷酶(STK)ELISA试剂盒MATELISAKit产品规格:48T/96T。
人超抗原(Sag)ELISA试剂盒MAU/ALBELISAKit产品规格:48T/96T。
人脂多糖/内素(LPS)ELISA试剂盒MBLRELISAKit产品规格:48T/96T。
人非甲基化寡核苷(NON)ELISA试剂盒MBP/MBLELISAKit产品规格:48T/96T。
人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA试剂盒MBPELISAKit产品规格:48T/96T。
人甲酰甲硫氨(fMet)ELISA试剂盒MBPELISAKit产品规格:48T/96T。
人丝氨蛋白酶(PRSS)ELISA试剂盒MBPELISAKit产品规格:48T/96T。
