公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
小细胞肺癌细胞;LTEP-sm | 贴壁生长 | EY-X63435 |
细胞名称 小细胞肺癌细胞;LTEP-sm
形态特性: 上皮样,多边形及圆形细胞
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 1980年建系,人肺小细胞肺癌,组织块法培养,10日细胞生长,*传代112日;免疫缺陷小鼠皮下移植成功。STR检测发现该细胞与另外两株肺癌细胞LTEP-a2、LTEP-a3为同一遗传背景,怀疑存在细胞间的交叉污染。
培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法:
传代情况: P87
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法(-)
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
StemXVivo Osteogenic Sup (1 VL)细胞名称: 表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞;293ET IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS
StemXVivo Osteo/Adipogenic Med (250 ML)细胞名称: 表达小鼠MHCⅠ类分子Kb的人胚肾细胞;293KB IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS
StemXVivo MSC Media (250 ML)细胞名称: 人胎盘绒膜癌细胞;BeWo F12:Ham'sF12NutrientMixture10%FBS
StemXVivo Culture Matrix (1 ML)细胞名称: 小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-L1 IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%小牛血清
StemXVivo Chondrogenic Sup (1 VL)细胞名称: SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
StemXVivo Chondrogenic Media (50 ML)细胞名称: SV40T转化的人胚肾细胞;293T DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
SSEA-4 PerCP MAb (MC-813-70) (100 TESTS)细胞名称: 人结直肠腺癌细胞;HCT116[HCT116] IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS
SSEA-4 NL637 MAb (MC-813-70) (0.5 ML)细胞名称: 人肾皮质近曲小管上皮细胞;HK-2 DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS
SSEA-4 NL557 MAb (MC-813-70) (0.5 ML)细胞名称: 野生型人c-kit受体细胞株;A7d RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;IL-3
SSEA-4 Fluor MAb (MC-813-70) (100 TESTS)细胞名称: 人肾小管上皮细胞;HKC DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)5%FBS
SOD Assay (100 TESTS)细胞名称: 人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77 IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS
shHRP-DAB CTS Kit (50 TESTS)细胞名称: 人结直肠腺癌细胞;LoVo F12K10%FBS
shHRP-AEC CTS Kit (50 TESTS)细胞名称: 人口腔表皮样癌细胞;KB IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS
Ser/Thr Phosphatase Substr I (1 MG)细胞名称: 小鼠癌细胞;CCC-Ca761-03 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
SB Transposase MAb (324622) (100 UG)细胞名称: 人结直肠腺癌细胞;SW480[SW480;SW-480] IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS
SB Transposase Aff Pur PAb (100 UG)细胞名称: Sars结构蛋白表达株;293sars181A IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS
小细胞肺癌细胞;LTEP-sm猪白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒IL-3ELISAKIT产品规格:48T/96T。
猪β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒IL-3ELISAKit产品规格:48T/96T。
猪肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒IL-3ELISAKit产品规格:48T/96T。
人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA试剂盒IL-3ELISAKit产品规格:48T/96T。
人龙(Prednisolone)ELISA试剂盒IL-3ELISAKIT产品规格:48T/96T。
人钙联蛋白(calnexin)ELISA试剂盒IL-4ELISAKIT产品规格:48T/96T。
人金葡菌肠素(SE)ELISA试剂盒IL-4ELISAKIT产品规格:48T/96T。
人性休克综合征素1(TSST-1)ELISA试剂盒IL-4ELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。