公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild | 贴壁生长 | EY-X63654 |
细胞名称 犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系源自一只雌性英国可卡犬的肾脏组织,由S.H.MadinandN.B.Darby于1958年建立。该细胞为角蛋白阳性细胞。
培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
传代方法: 1:3传代,2-3天传一代
传代情况: C7
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Picrasidine A
CAS No.:82652-20-8
中文名:
分子式:C27H22N4O3
假荆芥属苷;Nepitrin 订购|咨询 钙黏蛋白18(CDH18) 规格: 20mg
基黄连;Worenine chlor 订购|咨询 钙黏蛋白19(CDH19) 规格: 20mg
红松内酯;Pinusolide 订购|咨询 钙黏蛋白20(CDH20) 规格: 20mg
黄杞苷;Emgelitin 订购|咨询 钙黏蛋白22(CDH22) 规格: 20mg
枸橘苷;Poncirin 订购|咨询 钙黏蛋白23(CDH23) 规格: 20mg
番茄红素;Lycopene 订购|咨询 钙黏蛋白24(CDH24) 规格: 20mg
冬凌草素;Ponicidin 订购|咨询 钙黏蛋白26(CDH26) 规格: 10mg
大麦芽;Hordenine 订购|咨询 钙黏蛋白7(CDH7) 规格: 20mg
草质素苷;Rhodionin;Herba 订购|咨询 钙黏蛋白8(CDH8) 规格: 20mg
长梗冬青苷;Pedunculoside 订购|咨询 钙黏蛋白9(CDH9) 规格: 20mg
白蜡树精;Fraxil 订购|咨询 /氢交换因子1(NHE1) 规格: 20mg
L薄荷;LMenthol 订购|咨询 //钙交换因子1(NCKX1) 规格: 20mg
格洛苷C;Angoroside C 订购|咨询 //钙交换因子2(NCKX2) 规格: 20mg
磺间氧;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 /离子转运ATP酶α1肽(ATP1α1) 规格: 0.1g
亚;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 /离子转运ATP酶α2肽(ATP1α2) 规格: 0.1g
扑草净;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 /离子转运ATP酶β1肽(ATP1β1) 规格: 0.1g
酰草;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 /离子转运ATP酶β1肽(ATP1β1) 规格: 0.1g
草;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 /离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3) 规格: 0.1g
DDIT4L DNA损伤诱导转录样蛋白4抗体 现货供应 0.2ml Oxybutynin HCl
DEAF1/Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1 畸形表皮自调节因子1抗体 现货供应 0.2ml Oxybutynin HCl
EID3 E1A样分抑制因子3抗体 现货供应 0.2ml Paroxetine HCl
ERCC6L 发育相关蛋白ERCC6L抗体(致畸因子) 现货供应 0.2ml Paroxetine HCl
FAM107A 肾细胞癌下调蛋白1抗体 现货供应 0.2ml Piroxicam
FRK/PTK5 胃肠道相关酪激酶抗体(蛋白酪激酶5) 现货供应 0.2ml Piroxicam
GANP 生发中心相关核蛋白MCM3抗体 现货供应 0.2ml Posaconazole
GIDRP88 生长抑制和分相关蛋白抗体 现货供应 0.2ml Posaconazole
栎精 进口、国产 英文名称:Quercetin 含量:BR,99%
进口、国产 英文名称:Furazolidone 含量:BR
联大茴香 进口、国产 英文名称:3,3'Dimethoxybenzidine 含量:BR,4%
联大茴香 进口、国产 英文名称:oDianisidinedihydrochloride 含量:高纯,98%
链酶亲和素 进口、国产 英文名称:Streptavidin 含量:生物技术级,10u/mg
链霉菌属十字孢 进口、国产 英文名称:StaurosporinefromStreptomycessp. 含量:USP级,99%
链脲 进口、国产 英文名称:Streptozotocin 含量:BR,9600%
链球菌纤溶酶 进口、国产 英文名称:Streptokinaserecombinant 含量:高纯,30u/mg
链丝菌蛋白酶 进口、国产 英文名称:PronaseE 含量:BR,300u/mg
两性 进口、国产 英文名称:AmphotericinB 含量:BR,90%
犬肾细胞系/野生型;MDCK/wildPPLO琼脂规格:250g用途:用于支原体分离和培养的基础培养基
卫矛醇半固体规格:20支详情介绍
木糖赖氨脱氧胆盐琼脂对照培养基规格:11.0g/200mL,30袋/盒用途:培养基适用性实验
LG培养基规格:250g用途:用于霉菌、酵母菌、耐热霉菌及细菌总数的检测,可用于PET瓶及无菌罐装线的无菌验证。
亚碲钾血琼脂基础规格:250g用途:用于白喉杆菌的分离培养
SC琼脂基础规格:50%卵黄乳液用途:5ml
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。