公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C | 贴壁生长 | EY-X63658 |
细胞名称 非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C
形态特性: 上皮样细胞
生长特性: 贴壁生长
特征特性: Vero-HCV-C细胞整合有丙型肝炎病毒的Core基因,能稳定表达C蛋白,是HCV基础研究的*摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室于2008年构建并保存。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
传代方法: 1:3传代,2-3天传一代
传代情况: C25
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Paniculidine C
CAS No.:97399-95-6
中文名:
分子式:C13H17NO
庚;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 类固5α还原酶2(SRD5α2) 规格: 0.1g
代锌;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 类固5α还原酶2(SRD5α2) 规格: 0.25g
啶对照品;有报告 订购|咨询 类固生成因子1(SF1) 规格: 100mg
L谷;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 类固合成急性调节蛋白(STAR) 规格: 0.1g
烟酰;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 类(TPS) 规格: 0.25g
箭藿苷A 订购|咨询 类(TPS) 规格: HPLC≥98%;5mg
瓜子金皂苷V 订购|咨询 类(TPS) 规格: HPLC≥95%;20mg
桔梗皂苷D2 订购|咨询 类(TPS) 规格: HPLC≥98%;20mg
介芬 订购|咨询 类(TPS) 规格: HPLC≥98%;20mg
育亨宾 订购|咨询 类(TPS) 规格: HPLC≥98%;20mg
(+)松萝 订购|咨询 类β2(TPSβ2) 规格: HPLC≥98%;20mg
白藜芦 订购|咨询 类γ1(TPSγ1) 规格: HPLC≥98%;20mg
格列 订购|咨询 类δ1(TPSδ1) 规格: HPLC≥98%;20mg
突厥 订购|咨询 类脂肪酶A(LPHA) 规格: HPLC≥98%;20mg
水甘草 订购|咨询 类粘蛋白2(ORM2) 规格: HPLC≥98%;20mg
1羟基2,3,4,7四氧基山山 订购|咨询 前B淋巴细胞基因1(VPREB1) 规格: HPLC≥98%;10mg
毛地黄素 订购|咨询 前B淋巴细胞基因3(VPREB3) 规格: HPLC≥98%;20mg
雷帕 订购|咨询 前动力蛋白2(PK2) 规格: HPLC≥98%;20mg
AMBP/Alpha 1 microglobulin α1微球蛋白抗体 现货供应 0.2ml Glyburide/Gliebenclamide
A2BP1/Fox1 共济失调蛋白2结合蛋白1抗体 现货供应 0.2ml Glyburide/Gliebenclamide
RLLM1/C14orf166 胰腺癌转移相关蛋白RLLM1抗体 现货供应 0.2ml Glimepiride
ABC2/C17orf71 癌增强蛋白2抗体 现货供应 0.2ml Glimepiride
CA8 酶相关蛋白8抗体 现货供应 0.2ml Griseofulvin;Fulcin
CAB1 钙通道电压依赖性β1蛋白抗体 现货供应 0.2ml Griseofulvin
CDK5RAP3 周期素依赖性激酶5激活结合蛋白C53抗体 现货供应 0.2ml Sodium hyaluronate
CENPH 着丝粒蛋白H抗体 现货供应 0.2ml Hydrocortisone
银 进口、国产 英文名称:Silverchloride 含量:BR,97%
磺酚S 进口、国产 英文名称:ChlorosulphonphenolS 含量:CP
甲基树脂 进口、国产 英文名称:Merrifieldresin 含量:BR
甲芴基甲酯 进口、国产 英文名称:FMOCC1 含量:BR,99%
甲甲基酯 进口、国产 英文名称:CBZCL 含量:BR,98%
亚铂钾 进口、国产 英文名称:Potassiumchloroplatinite 含量:FGC,98.5%
亚铑铵 进口、国产 英文名称:Ammoniumhexachloroplatinate(IV) 含量:AR,86.8%
亚明T 进口、国产 英文名称:ChloramineTtrihydrate 含量:超纯,99%
酰 进口、国产 英文名称:2Chloroeth* 含量:高纯
青 进口、国产 英文名称:Cloxacillinsodiumsalthydrate 含量:高纯,916ug/mg
非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C冻干兔血浆规格:0.5ml*10用途:用于金黄色葡萄球菌的血浆凝固酶试验(GB、SN标准)。
瑞氏染色液规格:5ml/支*8用途:用于细菌瑞氏染色
吐温稀释液规格:250g用途:用于样品制备水稀释
UVM培养基规格:250g用途:用于李氏菌的增菌培养
1/2B5培养基(不含琼脂和蔗糖)规格:250g用途:用于植物组织培养(不含琼脂和蔗糖)
煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)颗粒规格:300ml/袋*10用途:用于大肠菌群、大肠杆菌的测定(GB、SN标准)
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。