公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
非洲绿猴肾细胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1 | 贴壁生长 | EY-X63659 |
细胞名称 非洲绿猴肾细胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1
形态特性: 上皮样细胞
生长特性: 贴壁生长
特征特性: Vero-HCV-E1细胞整合有丙型肝炎病毒的E1基因,能稳定表达E1蛋白,是HCV基础研究的*摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室于2008年构建并保存。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
传代方法: 1:3传代,2-3天传一代
传代情况: C23
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
11-Hydroxycodaphniphylline
CAS No.:1186496-68-3
中文名:
分子式:C30H47NO4
2金刚 订购|咨询 前动力蛋白2(PK2) 规格: HPLC≥98%;20mg
伏格列波糖 订购|咨询 前动力蛋白2(PK2) 规格: HPLC≥98%;20mg
订购|咨询 前动力蛋白2(PK2) 规格: HPLC≥98%;20mg
扁桃 订购|咨询 前动力蛋白受体1(PKR1) 规格: HPLC≥98%;100mg
黄芪中分离物 订购|咨询 前动力蛋白受体1(PKR1) 规格: HPLC≥98%;5mg
阿多弗林 订购|咨询 前动力蛋白受体1(PKR1) 规格: HPLC≥98%;20mg
乔松素 订购|咨询 前动力蛋白受体1(PKR1) 规格: HPLC≥98%;20mg
异芒果苷 订购|咨询 前动力蛋白受体2(PKR2) 规格: HPLC≥98%;10mg
槐角苷 订购|咨询 前列环素(PGI2) 规格: HPLC≥98%;20mg
野靛 订购|咨询 前列腺干细胞抗原(PSCA) 规格: HPLC≥99%;20mg
新补骨脂异黄 订购|咨询 前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2) 规格: HPLC≥98%;20mg
蒽醌 订购|咨询 前列腺抑制肽(PIP) 规格: HPLC≥98%;20mg
3β氧基7,25甘遂二24 订购|咨询 前列腺转谷酰酶(TGM4) 规格: HPLC≥98%;5mg
3,4,5三酰奎宁 订购|咨询 前列腺素D2(PGD2) 规格: HPLC≥98%;20mg
澳洲茄 订购|咨询 前列腺素D2合成酶(PGD2S) 规格: HPLC≥98%;20mg
桑皮苷A 订购|咨询 前列腺素D合酶(PTGDS) 规格: HPLC≥98%;20mg
人参皂苷Ro 订购|咨询 前列腺素E1(PGE1) 规格: HPLC≥98%;20mg
槲皮素7O葡萄糖苷 订购|咨询 前列腺素E2(PGE2) 规格: HPLC≥98%;10mg
CKAP4 细胞骨架相关蛋白4抗体 现货供应 0.2ml Hydrocortisone
CRISP3 富含半胱分泌蛋白3抗体 现货供应 0.2ml Ibutilide fumarate
CKMT/Creatine kinase MT 性型线粒体肌激酶抗体 现货供应 0.2ml Ibutilide fumarate
SCRO/DCUN1D1 鳞状细胞癌相关蛋白抗体 现货供应 0.2ml Isepamicine Sulphate
DDX53/CT26 肿瘤/抗原26抗体 现货供应 0.2ml Bexarotene
DEPDC1 细胞周期调控蛋白SDP35抗体 现货供应 0.2ml Bexarotene
ENTPD5/CD39L4 原癌基因CD39样蛋白4抗体 现货供应 0.2ml Ketoprofen
EST1A 端粒酶结合蛋白EST1A抗体 现货供应 0.2ml Ketoprofen
马来那敏 进口、国产 英文名称:Chlorpheniraminemaleate 含量:USP级,4400u/mg
马来二丁酯 进口、国产 英文名称:DBM 含量:CP
马来二甲酯 进口、国产 英文名称:Dimethylmaleate 含量:BR,95%
马来 进口、国产 英文名称:Maleicacid 含量:USP级,50万u/g
马来罗格列 进口、国产 英文名称:Rosiglitazonemaleate 含量:BR
马来 进口、国产 英文名称:Maleicacidsodiumsalt 含量:BR,97%
马栗树皮苷 进口、国产 英文名称:Esculinsesquihydrate 含量:AR,98%
马铃薯淀粉 进口、国产 英文名称:Starchfrompotato 含量:超纯,99%
马铃薯浸出粉 进口、国产 英文名称:Potatoextract 含量:超纯,98%
马尿L 进口、国产 英文名称:HippurylLphenylalanine 含量:BR,98%
非洲绿猴肾细胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1玫瑰红钠琼脂规格:BR250g详情介绍
改良纤维二糖--琼脂基础(MCPC)规格:纤维二糖详情介绍
艾格琼脂规格:250g用途:用于过程中无菌监测
性蛋白胨水颗粒规格:250g用途:用于霍乱弧菌选择性增菌培养(SN标准)
品红亚硫钠琼脂平板(9cm)规格:10个/包用途:用于饮用水、水源水中总大肠菌群的选择性分离和确证
琼脂培养基N(化十六基三琼脂)规格:250g用途:用于绿脓假单胞菌的分离培养
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。