商品描述：
| 产品名称 | DMEM 培养基 | 规格 | 500ml |
| 用途 | 仅供科研研究实验 | 货号 | EY-XP4246 |
DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量，同时又分为高糖型（4500mg/L）和低糖型(1000mg/L)。
DMEM是 dulbecco's modified eagle medium的缩写，所以其特点主要包括以下：
（1）氨基酸含量为依格尔培养基的2倍，且含有非必需氨基酸等；
（2）维生素含量为依格尔培养基的4倍；
（3）含有糖酵解途径中的重要物质——丙酮酸；
（4）含有微量的铁离子。
注意事项：
仅限科研用。
培养体系中的一些组分是对人体健康有害的物质，请不要用暴露的皮肤接触培养体系的液体和有培养体系的液体残留的容器内部；这部分有害物质的浓度和危害性都较低，如有接触，立即用自来水冲洗即可。
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备DMEM-H培养基(添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根据实验需要选择悬浮培养基，使293T细胞悬浮生长。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
公司正在出售的产品：
| 结肠癌细胞HCT116的耐药株 | 293T人胚肾细胞 |
| L1210/DDP小鼠白血病耐药株 | 769-P人肾细胞腺癌细胞 |
| L1210/DDP小鼠淋巴细胞白血病细胞耐细胞株 | 786-O 人肾透明细胞腺癌细胞 |
| L1210/Taxol小鼠白血病耐药株 | 95-D人高转移肺癌细胞 |
| HCT116/L-OHP人结肠癌耐细胞株 | A-431[A431]人皮肤鳞癌细胞 |
| MCF-7/ADR人乳腺癌耐药细胞株 | A875人黑色素瘤细胞 |
| BIU-87/DDP人膀胱癌耐药株 | ACC-2人涎腺腺样囊性癌细胞 |
| Huh-7/DDP人肝癌耐药株 | ACC-M人涎腺癌细胞 |
| HCT8/DDP人结肠癌耐药株 | BEAS-2B人支气管上皮样细胞 |
| SMMC-7721/DDP人肝癌耐药株 | BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞 |
| A2780/DDP人卵巢癌耐药株 | C33A人子宫颈癌细胞 |
| HO-8910/DDP人卵巢耐药株 | Caki-2人肾透明细胞癌细胞 |
| K562/DDP人白血病耐药株 | CAL-27人舌鳞癌细胞 |
| MCF7/DDP人乳腺癌耐药株 | Caov-3人卵巢癌细胞 |
| A549/FU人肺癌氟耐药株 | CaSki人宫颈癌上皮细胞 |
| SGC7901/FU人胃癌氟耐药株 | CCC-HPF-1人胚肺成纤维细胞 |
| PATU-8988/FU人胰腺癌氟耐药株 | CNE-2Z人鼻咽癌细胞 |
| SMMC7721/FU人肝癌氟耐药株 | COLO 201人结直肠腺癌细胞 |
| HCT8/FU人结肠癌氟耐药株 | DAMI人巨核细胞白血病细胞 |
| ovo/FU人结肠癌氟耐药株 | DMEM 培养基DLD-1人结直肠腺癌上皮细胞 |
| A549/L人肺癌耐细胞株 | EA.hy926人脐静脉细胞融合细胞 |
| SMMC7721/L人肝癌耐药株 | ES-2人卵巢透明细胞癌细胞 |
| BEL/L人肝癌耐细胞株 | FaDu人咽鳞癌细胞 |
| lovo/L人结肠癌耐细胞株 | GBC-SD人胆囊癌细胞 |
操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
