本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测猪血清、血浆、组织匀浆及细胞上清液中的脂肪酸合成酶(FAS)浓度。检测范围覆盖0.625-40 ng/mL,灵敏度达0.28 ng/mL,适用于脂肪合成调控、脂质代谢紊乱、肥胖及畜牧营养研究等领域。
产品名称 | 猪脂肪酸合成酶(FAS)elisa试剂盒 | 英文名称 | FAS ELISA Kit |
货号 | CS-0206E | 规格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 仅供科研实验 |
核心原理:

固相化:微孔板预先包被抗猪FAS抗体。
结合:加入标准品或样本,FAS被固相抗体捕获。
检测:加入标记的抗猪FAS抗体和HRP标记的亲和素,形成"抗体-抗原-酶标抗体"复合物。
显色:加入TMB底物,被HRP催化后由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值),浓度与OD值成正比。
样本要求:

1. 样本类型与处理
血清:使用无热原/内毒素试管采集,避免溶血或脂血。1000×g离心10分钟分离血清,-20℃保存,避免反复冻融。
血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,离心后取上清。
细胞上清:1000×g离心10分钟去除颗粒,-70℃保存。
组织匀浆:生理盐水匀浆后离心取上清,-20℃保存。
2. 注意事项
样本中禁止添加NaN3,以免抑制HRP活性。
细胞培养上清可能因细胞状态等因素导致检测波动,建议设复孔。
操作步骤:

1. 试剂准备
将试剂盒平衡至室温(20-25℃),洗涤缓冲液按1:19稀释。
标准品梯度稀释:取6管标准品,按说明书稀释至0.156-10 ng/mL。
2. 实验流程
加样:每孔加入100μL标准品或样本,37℃孵育90分钟。
洗涤:弃去液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后甩干,重复5次。
加检测抗体:每孔加入100μL检测抗体-HRP,37℃孵育60分钟。
洗涤:
显色:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分钟。
终止:每孔加入50μL终止液,立即摇匀(颜色由蓝变黄)。
检测:450nm波长测定吸光度(OD值),15分钟内完成。
关键提示
显色底物避光保存,混合后应为无色。
终止液加入顺序需与显色一致,充分混匀避免绿色残留。
使用封板膜防止蒸发,确保孵育温度稳定。
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