产品简介：

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测猪血清、血浆、组织匀浆及细胞上清液中的血管紧张素 Ⅱ（ANG-Ⅱ）含量。检测范围覆盖常规科研适配区间，灵敏度满足微量样本检测需求，适用于肾素 - 血管紧张素系统、血压调控、血管收缩及水电解质平衡相关研究等领域。

产品名称：猪血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa试剂盒

英文名称：ANG-Ⅱ ELISA Kit

产品规格：48T/96T

产品货号：CS-0261E

检测原理：

猪血管紧张素 Ⅱ(ANG-Ⅱ) ELISA 试剂盒的原理是双抗体夹心法，通过固相载体捕获抗原，再用酶标记的检测抗体进行识别，最后通过底物显色反应来定量检测。

固相化：微孔板预先包被抗猪 ANG-Ⅱ 抗体。

结合：加入标准品或样本，ANG-Ⅱ 被固相抗体捕获。

检测：加入生物su化的抗猪 ANG-Ⅱ 抗体和 HRP 标记的亲和素，形成 "抗体 - 抗原 - 酶标抗体" 复合物。

显色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。

测定：用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值)，浓度与 OD 值成正比。

实验步骤‌：

‌试剂准备‌：将试剂盒平衡至室温(20-25℃)，洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。

‌加样‌：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。

‌洗涤‌：弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后甩干，重复5次。

‌加检测抗体‌：每孔加入100μL检测抗体-HRP，37℃孵育60分钟。

‌洗涤‌：同步骤3。

‌显色‌：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分钟。

‌终止‌：每孔加入50μL终止液，立即摇匀（颜色由蓝变黄）。

‌检测‌：450nm波长测定吸光度(OD值)，15分钟内完成。

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操作步骤‌：

‌1、试剂与样本准备‌：

将试剂盒平衡至室温（20-25℃），按说明书稀释洗涤缓冲液（通常1:19）。

‌标准品‌：用梯度稀释至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列浓度。

‌样本‌：血清、血浆或组织匀浆上清。若t-PA浓度高，可按说明书（如1:10）稀释。

‌2、加样与孵育‌：

每孔加入100μL标准品或样本。

轻轻振荡混匀，避免触碰孔壁。

37℃孵育90分钟（部分试剂盒可能为120分钟，需以说明书为准）。

‌3、洗涤‌：

弃去孔内液体，用洗涤缓冲液加满每孔，静置30秒后甩干，重复5-6次。

4‌、加检测抗体与孵育‌：

每孔加入100μL化抗猪t-PA检测抗体。

37℃孵育60分钟。

5‌、再次洗涤‌：

同步骤3，洗去未结合抗体。

6‌、显色‌：

每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。

37℃避光孵育10-15分钟。

‌7、终止与测定‌：

每孔加入50μL终止液，立即混匀（颜色由蓝变黄）。

在加终止液后15分钟内，用酶标仪在450nm波长处测定各孔吸光度（OD值）。