公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
肝癌细胞;Hep3b | 贴壁生长 | EY-X63854 |
细胞名称 肝癌细胞;Hep3b
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: Hep-3b细胞建系于1979年,源自一位患有肝癌的7岁黑人男童。该细胞产生甲胎蛋白(alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原(BHsAg)、白蛋白、巨球蛋白、α-抗(alphal-antitrypsin)、转铁蛋白、补体(C3)、C3活性载体,纤维原等,具有广泛的研究价值。
培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
传代方法: 1:4~1:6传代,每周换液2次
传代情况: C2
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法(-)
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
电压门控钾通道抗体检测试剂盒细胞名称: 人脑星形胶质母细胞瘤;U-118MG形态特性: 混合形voltage-gated potassium channel antibody
瘤病16型E6蛋白检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞(抗CD3);OKT3形态特性: 淋巴母细胞样papillomavirus 16 E6 protein
检测试剂盒细胞名称: 小鼠骨肉瘤成骨细胞;K7M2wt[K7M2-WT]形态特性: Digoxin
游离丙型肝炎病核心抗原检测试剂盒细胞名称: 人膀胱移行细胞癌;SW780[SW-780,SW780]形态特性: 上皮样;多角Free hepatitis C virus core antigen
白介素8受体β检测试剂盒细胞名称: EB病转化的人B淋巴细胞;KMYF形态特性: 淋巴母细胞样Interleukin 8 Receptor Beta
RAR相关孤儿素受体γ检测试剂盒细胞名称: 人膀胱移行细胞癌;UM-UC-3形态特性: 上皮样;多角RAR Related Orphan Receptor Gamma
抗磷脂IgG抗体检测试剂盒细胞名称: EB病转化的人B淋巴细胞;KMYB形态特性: 淋巴母细胞样anti-phospholipid IgG antibody
抗磷脂IgM抗体检测试剂盒细胞名称: 人膀胱移行细胞癌;J82形态特性: 上皮细胞样anti-phospholipid IgM antibody
白细胞抗原F检测试剂盒细胞名称: EB病转化的人B淋巴细胞;KMYM形态特性: 淋巴母细胞样human leucocyte antigen F
流行性脑膜炎球菌抗体检测试剂盒细胞名称: EB病转化的人B淋巴细胞;KMY0901形态特性: 淋巴母细胞样Epidemic Meningococcus antibody
3羧基4甲基5丙基2呋喃基检测试剂盒细胞名称: EB病转化的人B淋巴细胞;KMY0902形态特性: 淋巴母细胞样3 carboxy 4 methyl 5 propyl 2 furyl
人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病IgG抗体检测试剂盒细胞名称: EB病转化的人B淋巴细胞;KMY0904形态特性: 淋巴母细胞样Human T-lymphotropicvirusⅠ IgG
干扰素诱导蛋白44检测试剂盒细胞名称: EB病转化的人B淋巴细胞;KMY0905形态特性: 淋巴母细胞样interferon-inducible protein 44
酪氨蛋白激酶受体ErbB3检测试剂盒细胞名称: EB病转化的人B淋巴细胞;KMY0906形态特性: 淋巴母细胞样Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3
CD33分子检测试剂盒细胞名称: EB病转化的人B淋巴细胞;KMY0910形态特性: 淋巴母细胞样Cluster of differentiation 33
外异蛋白A检测试剂盒细胞名称: EB病转化的人B淋巴细胞;KMY0909形态特性: 淋巴母细胞样Ectodysplasin A
核因子红细胞2相关因子2检测试剂盒细胞名称: EB病转化的人B淋巴细胞;KMY0903形态特性: 淋巴母细胞样Nuclear factor erythroid 2-related factor 2
人肝癌细胞;Hep3b杯苋甾17086-76-9英文名:Cyasterone
英文别名:(22R,24S,25S,28R)-2β,3β,14,20,22,28-Hexahydroxy-6-oxo(26-13C)-5β-stigmasta-7-ene-26-oic acid γ-lactone
CAS登录号:17086-76-9
分子式:C29H44O8
分子量:520.65
分子结构:
外观:白色针晶粉
规格:20 mg/支
纯度:≥ 98%
用途:用于含量测定/鉴定/药理实验等。
提取来源:苋科杯苋属植物川牛膝(Cyathula officinalis Kuan.)的干燥根
溶解性:溶于、乙醇,DMSO。
熔点:164-166℃
旋光度:+64.5°()
药理药效:养血舒筋, 祛风除湿。
贮存条件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。