产品简介：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测大鼠血清、血浆、细胞膜蛋白提取物、组织匀浆及细胞上清液中的 5'- 核苷酸酶，胞膜（NT5E/CD73）蛋白浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL，灵敏度达 0.16 ng/mL，适用于嘌呤代谢、免疫抑制微环境、肿瘤代谢及细胞外核苷酸调控研究领域。
产品名称：大鼠5'-核苷酸酶,胞膜elisa试剂盒
英文名称：NT5E/CD73 ELISA Kit
产品规格：48T/96T
产品货号：CS-6253E
检测原理：
大鼠 5'- 核苷酸酶，胞膜 (NT5E/CD73) ELISA 试剂盒的原理是双抗体夹心法，通过固相载体捕获抗原，再用酶标记的检测抗体进行识别，最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化：微孔板预先包被抗大鼠 NT5E/CD73 抗体。
结合：加入标准品或样本，NT5E/CD73 被固相抗体捕获。
检测：加入生物su化的抗大鼠 NT5E/CD73 抗体和 HRP 标记的亲和素，形成 "抗体 - 抗原 - 酶标抗体" 复合物。
显色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。
测定：用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值)，浓度与 OD 值成正比。
实验步骤：
试剂准备：将试剂盒平衡至室温(20-25℃)，洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。
加样：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。
洗涤：弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后甩干，重复5次。
加检测抗体：每孔加入100μL检测抗体-HRP，37℃孵育60分钟。
洗涤：同步骤3。
显色：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分钟。
终止：每孔加入50μL终止液，立即摇匀（颜色由蓝变黄）。
检测：450nm波长测定吸光度(OD值)，15分钟内完成。
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关键实操技巧：
1.加样技巧
一次性换新枪头，垂直贴孔壁低位加液；避免气泡、飞溅交叉污染；整板加样速度均匀统一。
2.温育控温
须37℃恒温、封板膜严实防蒸发冷凝；时间严格卡死，过长背景高、过短信号低。
3.洗板核心
每孔注满不溢出，浸泡≥30 s；拍干用无尘吸水纸，杜绝残留；洗板不足直接高背景、假阳性。
4.样本规范
杜溶血、脂浊、污染样本；禁止反复冻融；严禁含 NaN₃抑制 HRP 活性；浓度超标只用试剂盒配套稀释液。
5.显色与读数
全避光；整板显色时长一致；加终止液立刻读数，放置越久数值漂移越大。
6.基础质控
样本、标准均做复孔；室温洁净避光操作；试剂分装取用，减少反复开盖失效。
