产品简介：

本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞提取物中的花生四烯酸（AA）含量。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL，灵敏度达 0.16 ng/mL，适用于脂质代谢、炎症反应、前列腺素合成及心血管疾病研究等领域。

产品名称：大鼠花生四烯酸(AA)elisa试剂盒

英文名称：AA ELISA Kit

产品规格：48T/96T

产品货号：CS-5833E

检测原理：

大鼠花生四烯酸 (AA) ELISA 试剂盒的原理是‌竞争法‌，通过固相载体包被抗原，样本中抗原与固相抗原竞争结合特异性抗体，最后通过底物显色反应来定量检测。

‌固相化‌：微孔板预先包被 AA 人工抗原。

‌结合‌：加入标准品或样本与特异性抗体混合液，AA 与固相抗原竞争结合抗体。

‌检测‌：加入 HRP 标记的二抗，与结合在固相载体上的抗体形成复合物。

‌显色‌：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。

‌测定‌：用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值)，浓度与 OD 值成反比。

实验步骤‌：

‌试剂准备‌：将试剂盒平衡至室温(20-25℃)，洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。

‌加样‌：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。

‌洗涤‌：弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后甩干，重复5次。

‌加检测抗体‌：每孔加入100μL检测抗体-HRP，37℃孵育60分钟。

‌洗涤‌：同步骤3。

‌显色‌：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分钟。

‌终止‌：每孔加入50μL终止液，立即摇匀（颜色由蓝变黄）。

‌检测‌：450nm波长测定吸光度(OD值)，15分钟内完成。

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操作步骤‌：

1.试剂平衡试剂盒室温平衡 30 min；浓缩洗涤液按说明书稀释混匀。

2.设孔加样设空白、标准品、待测样品孔，精准加样，封板。

3.温育结合37℃孵育 30–60 min，弃液拍干。

4.洗板加满洗涤液浸泡，甩干拍干，重复3–5 次。

5.加酶结合物除空白孔外每孔加 HRP 标记液，封板 37℃孵育。

6.再次洗板充分洗净未结合游离酶，控干残留液体。

7.显色避光加显色液 A/B，避光 37℃显色 10–15 min。

8.终止读数加终止液变色稳定后，立刻酶标仪读 OD 值。

9.结果计算标准曲线拟合，换算样本浓度。