本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测大鼠血清、血浆中的 VLDL 浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL,灵敏度达 0.16 ng/mL,适用于脂质代谢、甘油三酯转运、脂肪肝及动脉粥样硬化模型研究等领域。
产品名称 | 大鼠极低密度脂蛋白(VLDL)elisa试剂盒 | 英文名称 | VLDL ELISA Kit |
货号 | CS-5789E | 规格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 仅供科研实验 |
核心原理:
固相化:微孔板预先包被抗大鼠 VLDL 抗体。
结合:加入标准品或样本,VLDL 被固相抗体捕获。
检测:加入化的抗大鼠 VLDL 抗体和 HRP 标记的亲和素,形成 "抗体 - 抗原 - 酶标抗体" 复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成正比。
样本要求:
1. 血清:避免溶血脂血,离心分离,-20℃分装,禁反复冻融。
2. 血浆:EDTA / 柠檬酸盐抗凝,慎用肝素,离心取上清。
3. 细胞上清:离心除杂质,-80℃保存。
4. 组织匀浆:冰上匀浆、高速离心取上清低温储存。
5. 禁忌:勿加叠氮钠抑制 HRP;拒收污染溶血样本,建议复孔检测。
操作步骤:
1.平衡试剂:试剂盒室温平衡 30 min,浓缩洗涤液按比例稀释备用。
2.加样:设空白孔、标准品孔、样品孔,每孔加对应标准品 / 稀释后样本,封板温育。
3.温育反应:37℃孵育 30–60 min,完成抗原抗体结合。
4.洗板:弃液甩干,洗涤液注满每孔,浸泡后拍干,重复洗板3–5 次。
5.加酶结合物:除空白孔外,每孔加入 HRP 标记抗体,封板 37℃再次温育。
6.再次洗板:同上述洗板流程,洗净未结合游离酶标物。
7.显色:每孔先后加入 A、B 显色液,避光 37℃显色 10–15 min。
8.终止读数:加终止液终止反应,颜色由蓝变黄;立即用酶标仪在对应波长测定 OD 值。
9.结果计算:以标准品浓度、OD 值绘制标准曲线,换算样本待测指标浓度。
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