产品简介：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测大鼠血清、血浆、骨组织匀浆及细胞上清液中的骨粘连蛋白（ON）蛋白浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL，灵敏度达 0.16 ng/mL，适用于骨发育、骨损伤修复、骨质疏松及骨关节疾病研究等领域。
产品名称：大鼠骨粘连蛋白(ON)elisa试剂盒
英文名称：ON ELISA Kit
产品规格：48T/96T
产品货号：CS-5863E
检测原理：
大鼠骨粘连蛋白 (ON) ELISA 试剂盒的原理是双抗体夹心法，通过固相载体捕获抗原，再用酶标记的检测抗体进行识别，最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化：微孔板预先包被抗大鼠 ON 抗体。
结合：加入标准品或样本，ON 被固相抗体捕获。
检测：加入生物su化的抗大鼠 ON 抗体和 HRP 标记的亲和素，形成 "抗体 - 抗原 - 酶标抗体" 复合物。
显色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。
测定：用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值)，浓度与 OD 值成正比。
实验步骤：
试剂准备：将试剂盒平衡至室温(20-25℃)，洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。
加样：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。
洗涤：弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后甩干，重复5次。
加检测抗体：每孔加入100μL检测抗体-HRP，37℃孵育60分钟。
洗涤：同步骤3。
显色：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分钟。
终止：每孔加入50μL终止液，立即摇匀（颜色由蓝变黄）。
检测：450nm波长测定吸光度(OD值)，15分钟内完成。
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操作步骤：
1.平衡试剂：试剂盒室温平衡 30 min，浓缩洗涤液按比例稀释备用。
2.加样：设空白孔、标准品孔、样品孔，每孔加对应标准品 / 稀释后样本，封板温育。
3.温育反应：37℃孵育 30–60 min，完成抗原抗体结合。
4.洗板：弃液甩干，洗涤液注满每孔，浸泡后拍干，重复洗板3–5 次。
5.加酶结合物：除空白孔外，每孔加入 HRP 标记抗体，封板 37℃再次温育。
6.再次洗板：同上述洗板流程，洗净未结合游离酶标物。
7.显色：每孔先后加入 A、B 显色液，避光 37℃显色 10–15 min。
8.终止读数：加终止液终止反应，颜色由蓝变黄；立即用酶标仪在对应波长测定 OD 值。
9.结果计算：以标准品浓度、OD 值绘制标准曲线，换算样本待测指标浓度。
