产品简介:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测大鼠血清、血浆中的 α1-AGP 浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL,灵敏度达 0.16 ng/mL,适用于急性期炎症反应、感染、创伤、肿瘤及炎症活动性评价研究。
产品名称:大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa试剂盒
英文名称:α1-AGP ELISA Kit
产品规格:48T/96T
货号:CS-6143E
检测原理:
大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP) elisa试剂盒的原理是双抗体夹心法,通过固相载体捕获抗原,再用酶标记的检测抗体进行识别,最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化:微孔板预先包被抗大鼠 α1-AGP 抗体。
结合:加入标准品或样本,α1-AGP 被固相抗体捕获。
检测:加入化的抗大鼠 α1-AGP 抗体和 HRP 标记亲和素,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成正比。
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实验步骤:
1.试剂准备
将试剂盒平衡至室温(20-25℃),浓缩洗涤液按 1:20 稀释备用。
标准品按说明书进行梯度稀释,配制系列浓度标准曲线溶液。
2.实验流程
加样:设置空白孔、标准孔、待测样品孔,空白孔仅加稀释液,其余孔分别加入标准品或待测样品,37℃孵育。
加酶标抗体:除空白孔外,每孔加入酶标抗体,轻轻混匀,37℃避光孵育。
洗涤:弃去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后甩干,重复洗涤 4-5 次,最后拍干残留液体。
显色:每孔加入 TMB 显色液,37℃避光孵育,孔内呈现蓝色。
终止:每孔加入终止液,混匀后颜色由蓝色转为黄色。
检测:在 450nm 波长下测定各孔 OD 值,15 分钟内完成读数。
3.关键提示
实验全程严格控温,孵育时使用封板膜避免蒸发。
洗涤需充分,否则易造成高背景、结果偏差。
显色液需避光,终止顺序与加样顺序保持一致,确保充分混匀。