本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测大鼠血清、血浆中的 PCT 浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL,灵敏度达 0.16 ng/mL,适用于细菌感染、脓毒症、全身炎症反应综合征及感染鉴别研究等领域。
产品名称 | 大鼠降钙素原(PCT)elisa试剂盒 | 英文名称 | PCT ELISA Kit |
货号 | CS-5772E | 规格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 仅供科研实验 |
核心原理:

固相化:微孔板预先包被抗大鼠 PCT 抗体。
结合:加入标准品或样本,PCT 被固相抗体捕获。
检测:加入化的抗大鼠 PCT 抗体和 HRP 标记的亲和素,形成 "抗体 - 抗原 - 酶标抗体" 复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成正比。
样本要求:

1. 样本类型与处理
血清:使用无热原/内毒素试管采集,避免溶血或脂血。1000×g离心10分钟分离血清,-20℃保存,避免反复冻融。
血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,离心后取上清。
细胞上清:1000×g离心10分钟去除颗粒,-70℃保存。
组织匀浆:生理盐水匀浆后离心取上清,-20℃保存。
2. 注意事项
样本中禁止添加NaN3,以免抑制HRP活性。
细胞培养上清可能因细胞状态等因素导致检测波动,建议设复孔。
操作步骤:

1. 试剂准备
将试剂盒所有组分平衡至室温(20–25℃,≥30min);浓缩洗涤液按 1:19 稀释配制工作液。
标准品用标准品稀释液复溶,梯度稀释,配置系列浓度梯度标准溶液,备用。
2. 实验流程
加样:设置空白孔、标准孔、样本孔,每孔加入 100 μL 对应标准品 / 待测样本,封板,37℃恒温孵育 90 min。
洗涤:弃净孔内液体,每孔加满洗涤工作液,静置 30 s,甩干拍净,重复洗涤 5 次。
加酶结合物:每孔加入 100 μL HRP 标记检测抗体,封板混匀,37℃孵育 60 min。
洗涤:重复上述洗涤步骤 5 次,拍干微孔。
显色:每孔避光加入 90 μL TMB 底物显色液,轻柔混匀,37℃避光显色 15 min。
终止:按同等顺序每孔快速加入 50 μL 终止液,轻晃混匀,溶液由蓝转黄。
读数:15 min 内,酶标仪 450 nm 波长测定各孔 OD 值,拟合标准曲线计算样本含量。
3. 关键质控要点
全程孵育使用专用封板膜,防止液体蒸发、交叉污染。
洗涤充分为实验核心,残留洗液易造成背景偏高、假阳性。
TMB 显色液避光储存,现用现加,严禁接触氧化剂。
加终止液顺序需与显色加样一致,避免局部色差、绿色残留。
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