产品简介:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测大鼠细胞质蛋白、细胞裂解液、组织匀浆中的 KEAP1 浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL,灵敏度达 0.16 ng/mL,适用于 Nrf2 通路调控、氧化应激、泛素化降解及抗氧化应答机制研究。
产品名称:大鼠Kelch样ECH相关蛋白1elisa试剂盒
英文名称:KEAP1 ELISA Kit
产品规格:48T/96T
货号:CS-6186E
检测原理:
大鼠Kelch样ECH相关蛋白1 elisa试剂盒的原理是双抗体夹心法,通过固相载体捕获抗原,再用酶标记的检测抗体进行识别,最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化:微孔板预先包被抗大鼠 KEAP1 抗体。
结合:加入标准品或样本,KEAP1 被固相抗体捕获。
检测:加入化的抗大鼠 KEAP1 抗体和 HRP 标记亲和素,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成正比。
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实验步骤:
1. 试剂回温至 20–25℃,稀释洗涤液、梯度配制标准品。
2. 每孔加 100μL 标准 / 样本,37℃孵育 90min,洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗体,37℃孵育 60min,再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光显色 15min,加终止液混匀。
5. 450nm 快速测 OD 值,拟合曲线算浓度。