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盘羊皮肤细胞;ASHS2
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  盘羊皮肤细胞;ASHS2的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

盘羊皮肤细胞;ASHS2

贴壁生长

EY-X63830

细胞名称  盘羊皮肤细胞;ASHS2
形态特性: 成纤维细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞系来源于一雌性盘羊的耳组织。1997年由中科院昆明细胞库建立。

培养条件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%FBS

传代方法: 1:2传代;3-4天一次

传代情况: P3

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 荧光法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
CD2关联蛋白检测试剂盒细胞名称: 人肺癌杂交细胞;2F7形态特性: 上皮细胞样CD2 Associated Protein

转化受体电位阳离子通道亚家族C成员6检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;FZ201形态特性: 淋巴母细胞样Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily C, Member 6

γ谷氨酰转移酶2检测试剂盒细胞名称: 人纤维肉瘤细胞系;JH-2形态特性: 成纤维细胞样gamma glutamyl transpeptidase 2

1检测试剂盒细胞名称: 人淋巴瘤细胞;CelllineoflymphPenarusmonodon形态特性: 淋巴母细胞样Estrone 1

TP53诱导糖酵解凋亡调节蛋白检测试剂盒细胞名称: 仓鼠肾细胞;HL-1形态特性: 成纤维细胞样TP53 Induced Glycolysis And Apoptosis Regulator

嗜中性粒细胞过氧化氢酶检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;13D8形态特性: 淋巴母细胞样Neutrophil Hydrogen Peroxidase

肽基脯氨异构酶酶FKBP25抗体检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;6A3形态特性: 淋巴母细胞样FKBP25

E6AP;p53泛素化检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;3H5形态特性: 淋巴母细胞样E6AP;p53 Ubiquitination

信号素3G检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;RH1形态特性: 淋巴母细胞样SEMA3G

小泛素相关修饰蛋白1检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;BDRPDP形态特性: 淋巴母细胞样Small Ubiquitin Related Modifier Protein 1

RNA聚合酶Ⅲ抗体检测试剂盒细胞名称: 鼠舌黏膜鳞癌细胞;Rca-T形态特性: 上皮细胞样RNAPⅢ

乙型肝炎病前S2抗原检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;D12E9F11形态特性: 淋巴母细胞样HBV preS2Ag

肽基脯氨异构酶酶FKBP25检测试剂盒细胞名称: 人胚胎干细胞;SH.hEXl(46.xx)形态特性: 成纤维细胞样FKBP25

钙镁ATP酶检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;N-176-15形态特性: 淋巴母细胞样Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase

肿瘤异常蛋白检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;MabHS1形态特性: 淋巴母细胞样Tumorabnormalprotein

普列克底物蛋白同源物样域家族A成员2检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;MF4C4形态特性: 淋巴母细胞样PHLDA2

VI型胶原蛋白检测试剂盒细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;ZUB1形态特性: 淋巴母细胞样Collagen TypeVI
盘羊皮肤细胞;ASHS2无盐胨水规格:10支/盒用途:用于副溶血性弧菌的生化鉴定

42℃生长生化管规格:10支/盒用途:用于副溶血性弧菌的生化鉴定(SN)。

棉子糖发酵管a规格:用途:用于大肠杆菌O157和志贺氏菌的生化鉴定。

大肠埃希氏菌O157:H7/NM生化鉴定试剂盒(SN)规格:12支/盒用途:用于大肠埃希氏菌O157:H7/NM的生化鉴定。

三糖铁生化管规格:10支/盒用途:用于沙门氏菌、致泻大肠杆菌、单增李斯特氏菌和志贺氏菌的生化鉴定。

安洁清4号实验室玻璃器皿洗涤剂规格:10L/桶用途:用于实验室玻璃器皿的顽固性污染物的清洗。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

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