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产品名称:
大额牛肺细胞;BFR-L1
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  大额牛肺细胞;BFR-L1的详细资料:

细胞名称  大额牛肺细胞;BFR-L1
形态特性: 成纤维细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞系来源于一雄性新生大额牛的肺组织。2000年由中国科学院昆明细胞库建立。

培养条件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)胎牛血清15%

传代方法: 1:2传代;3-4天一次

传代情况: P3

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 荧光法(-)

产品名称

大额牛肺细胞;BFR-L1

生长特性

贴壁生长

货号

EY-X63777

产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。 
培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
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可溶性CD38检测试剂盒细胞名称: 人结肠腺癌细胞;LS180(CL-187)[LS180]形态特性: 上皮样soluble CD38

可溶性MHC-I链相关基因B检测试剂盒细胞名称: 人膀胱移行细胞癌细胞;T24形态特性: 上皮样soluble major histocompatibility complex class I chain-related gene B

可溶性OX40配体检测试剂盒细胞名称: 小鼠正常肝细胞;NCTC1469[NCTC1469]形态特性: 上皮样solution OX40 Ligand

可溶性sCD146分子检测试剂盒细胞名称: 人舌鳞癌细胞;Tca-8113[Tca8113]形态特性: 上皮样sCD146

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可溶性白介素7受体检测试剂盒细胞名称: 人颈鳞状细胞癌细胞;SiHa形态特性: 上皮样Soluble Interleukin-7 Receptor

可溶性白细胞分化抗原14检测试剂盒细胞名称: 293来源病包装细胞;ΦA-GP形态特性: 上皮样soluble cluster of differentiation 14

可溶性白细胞介素6检测试剂盒细胞名称: 293来源病包装细胞;ΦA形态特性: 上皮样soluble Interleukin 6

可溶性白细胞抗原G检测试剂盒细胞名称: 615小鼠T细胞性白血病瘤株;L7712形态特性: 腹水型sHLA-G

可溶性白细胞抗原-I检测试剂盒细胞名称: 615小鼠癌瘤株;Ca759形态特性: 实体瘤sHLA-I

可溶性补体受体1检测试剂盒细胞名称: 615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755形态特性: 实体瘤soluble Complement receptor type1

可溶性蛋白185检测试剂盒细胞名称: 615小鼠癌瘤株;Ca763形态特性: 实体瘤soluble protein 185

可溶性肝X受体检测试剂盒细胞名称: 615小鼠肺癌瘤株;HP615形态特性: 实体瘤soluble Liver X Receptor

可溶性共刺激分子4检测试剂盒细胞名称: 615小鼠癌瘤株;Ca761形态特性: 实体瘤sCTLA-4

可溶性胸苷激酶1检测试剂盒细胞名称: 615小鼠T细胞性白血病瘤株;L7912形态特性: 腹水型Thymidine Kinase 1, Soluble

可溶性血管内皮细胞生长因子受体1检测试剂盒细胞名称: 615小鼠状肺腺癌瘤株;P615形态特性: 实体瘤Soluble Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1
大额牛肺细胞;BFR-L1沙氏葡萄糖肉汤(SDB)规格:250g用途:用于药品或生物制品中真菌的培养

李氏菌增菌肉汤(LB1)规格:9ml*20支/包用途:用于李氏菌二步增菌

动力-硝盐培养基(B法)规格:250g用途:用于产气荚膜梭菌的动力和硝盐还原试验

玉米琼脂对照培养基规格:5.1g/300ml/袋用途:培养基适用性实验

酵母浸粉规格:250g用途:培养基原材料,提供细菌生长所需的族

大肠杆菌生化鉴定条(GB)规格:4种*2*5条用途:用于大肠杆菌的生化鉴定

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