细胞名称 胰腺癌细胞；AsPC-1
形态特性: 上皮样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞来源于人胰腺癌裸鼠异种移植产生的癌性腹水，可以表达CEA，人胰腺相关抗原、人胰腺特异性抗原和黏蛋白。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
传代方法: 1:3~1:6传代；每周换液2~3次。
传代情况: C6
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法（-）
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
胰腺癌细胞；AsPC-1 | 贴壁生长 | EY-X63368 |
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用4-羟基-3-甲基吡啶Human SEC23IP ELISA Kit
黄牛皮肤；BTA-S2拉丁属名: Lactobacillus plantarum subsp. plantarum2-氯-3-甲基-5-硝基吡啶Human VTCN1(V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1) ELISA Kit
大额牛皮肤；BFR-S3拉丁属名: Bacillus subtilis2-氯-3-甲基-5-硝基吡啶Human SEC24C ELISA Kit
大额牛肺；BFR-L1拉丁属名: Streptomyces cinereoruber subsp. fructofermentans6-氯-2-甲基-3-硝基吡啶Human SEC24A ELISA Kit
大额牛肾；BFR-K1拉丁属名: Lysinibacillus sp.6-氯-2-甲基-3-硝基吡啶Human SEC31A ELISA Kit
牛肾；MDBK注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用6-氯-2-甲基-3-硝基吡啶Human SDR39U1 ELISA Kit
新生牛支持系；NBS注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用2-氨基-5-硝基-6-甲基吡啶Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit
牛trim5α基因沉默株；BTL2013用途: 试验栽培2-氨基-5-硝基-6-甲基吡啶Human SEC61alpha ELISA Kit
牛甲状腺系；hTERT-BTY拉丁属名: Lactobacillus plantarum2-氟-4-吡啶Human SDR42E1 ELISA Kit
水牛皮肤成纤维样；WB-S5拉丁属名: Ambrosiozyma platypodis2-氟-4-吡啶Human SDCCAG8 ELISA Kit
水牛皮肤成纤维样；WB-S4拉丁属名: Micromonospora aurantiaca6-溴-2-甲基-3-硝基吡啶Human SCN4B ELISA Kit
水牛皮肤成纤维样；WB-S3用途: 外生菌根菌，有6-溴-2-甲基-3-硝基吡啶Human SDCCAG10 ELISA Kit
水牛皮肤成纤维样；WB-S2拉丁属名: Haloferax volcanii4-溴-2-甲基吡啶Human SCNM1 ELISA Kit
水牛皮肤成纤维样；WB-S1注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目
胰腺癌细胞；AsPC-1牛磷果糖激酶(PFK)ELISA试剂盒Hb-AGEELISAKit产品规格:48T/96T。
牛葡萄糖6磷脱氢酶(G6PD)ELISA试剂盒HBcAbELISAKit产品规格:48T/96T。
牛乳糖合成酶(LS)ELISA试剂盒HBcAbELISAKit产品规格:48T/96T。
牛白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒HbCELISAKit产品规格:48T/96T。
牛金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒HBc-IgGELISAKit产品规格:48T/96T。
牛磷烯醇式丙羧激酶(PCK)ELISA试剂盒HBc-IgMantibodyELISAKit产品规格:48T/96T。
牛β羟丁(βOHB)ELISA试剂盒HbCOELISAKit产品规格:48T/96T。
牛丙检测(acetone)ELISA试剂盒HBeAbELISAKit产品规格:48T/96T。
